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微生物的接种、分别、纯化与计数
(建议用时:40分钟)
题组一微生物接种和传代的无菌技术
1.下列关于菌种的接种和传代的说法错误的是()
A.低温、干燥、真空是菌种保存的重要条件
B.好氧微生物常用穿刺接种的方法
C.斜面接种是常用的菌种传代和低温下保存的方法
D.菌种的保存中要让微生物生长繁殖受抑制而不死亡
B[穿刺接种可将厌氧菌爱护在培育基中,使其在培育基深处的厌氧环境下生长。]
2.将接种后的培育基和一个未接种的培育基都放入37℃恒温箱的目的是()
A.对比视察培育基有没有被微生物利用
B.对比分析培育基是否被杂菌污染
C.没必要放入未接种的培育基
D.为了下次接种时再运用
B[对未接种的培育基进行培育,起到比照作用,可用来确定培育基是否被杂菌污染。]
题组二微生物分别、纯化和培育的无菌技术
3.下列关于平板划线操作的叙述,错误的是()
A.每次划线前都要灼烧接种环
B.灼烧接种环后,要马上用接种环接种,防止杂菌污染接种环
C.要在酒精灯火焰旁进行
D.接种前,要将菌种试管口通过火焰
B[灼烧接种环后,将接种环伸入管内,让环端先接触培育基上未长菌的部位,使其冷却,然后轻轻挑取少量菌体,再进行接种。灼烧接种环后,不行马上用接种环接种,以免接种环温度过高,将菌种杀死。]
4.在培育基上将细菌稀释或分散成单个细胞,使其长成单个的菌落,这个菌落就是一个纯化的细菌菌落。试验基本步骤如下:
eq\x(配制培育基)―→eq\x(灭菌、倒平板)―→eq\x(培育)―→eq\x(视察)
请回答下列有关问题:
(1)配制培育基时,各成分含量确定的原则是________________________。不论何种培育基,在各种成分都溶化后分装前,要进行的是______________。
(2)倒平板的相宜温度是50℃左右,缘由是________________________。待平板冷凝后,要将平板倒置,这样既可使培育基表面的水分更好地挥发,又可防止____________________。
(3)纯化菌株时,若运用稀释涂布平板法进行接种,应选择的涂布工具是图中的________;若运用平板划线法进行接种,应选择的接种工具是图中的________。
ABCD
(4)划线的某个平板培育后,第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌落,其次划线区域所划的第一条线上无菌落,其他划线上有菌落。造成划线无菌落可能的操作失误有______________________________________________。
(5)若用大肠杆菌进行试验,运用过的培育基及培育物必需经过________处理后才能丢弃,以防止培育物的扩散。
[解析](1)培育基中各成分含量要依据微生物的生长须要来确定。微生物生长须要肯定的pH,所以培育基装瓶前须要调整pH。(3)由图可知,A为接种环,B为涂布器,C为胶头滴管,D为接种针,故稀释平板法应选择的涂布工具是B,平板划线法应选择的接种工具是A。(4)由题意分析可知,造成此现象的缘由可能有两个:一是接种环灼烧后未冷却,菌种接触到高温的接种环而死亡;二是划其次划线区域第一条线时未从第一区域末端起先。(5)有的大肠杆菌会释放一种剧烈的毒素,因此,运用过的培育基及其培育物必需经过灭菌处理后才能丢弃,以防止培育物的扩散。
[答案](1)所培育微生物对各养分成分的须要量调整pH(2)温度过高会烫手,过低培育基又会凝固皿盖上的水珠落入培育基,造成污染(3)BA(4)接种环灼烧后未冷却;划线未从第一区域末端起先(5)灭菌
题组三土壤中分解尿素的细菌的分别与计数
5.分别土壤中分解尿素的细菌,对培育基的要求是()
①加尿素②不加尿素③加琼脂④不加琼脂⑤加葡萄糖⑥不加葡萄糖⑦加硝酸盐⑧不加硝酸盐
A.①③⑤⑦ B.②④⑥⑧
C.①③⑤⑧ D.①④⑥⑦
C[尿素和硝酸盐都能作为氮源,而培育尿素分解菌的培育基应是以尿素为唯一氮源的固体培育基,因此培育基中应不加硝酸盐,加入尿素和琼脂。葡萄糖作为碳源,也须要加入。]
6.分别土壤中分解尿素菌的试验操作中,对于获得纯化的尿素分解菌的单菌落影响最大的是()
A.制备浸出液的土壤取自土壤的表层
B.涂布前涂布器未在酒精灯外焰上灼烧灭菌
C.牛肉膏蛋白胨培育基中添加尿素作为氮源
D.接种操作者的双手未用酒精棉进行消毒
C[制备浸出液的土壤取自土壤的表层对纯化的尿素分解菌的单菌落影响不大,A不符合题意;涂布器未在酒精灯外焰上灼烧灭菌可能会造成污染,但对纯化的尿素分解菌的单菌落影响不大,B不符合题意;该培育基必需以尿素为唯一的氮源,不能运用牛肉膏蛋白胨培育基或在其中添加尿
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