基于斑马鱼模型评价三萜天然产物和低氘水生物活性的研究.pdf

中文摘要

炎症是机体面对各种刺激时发生的基本病理过程，在肿瘤发生、发展、恶性转

变、侵袭和转移阶段发挥着关键的作用。结直肠癌是全球第三大高发癌症，对人类

的健康造成了巨大威胁，而结肠炎迁延不愈是结肠癌发生的重要因素。目前无论对

于结肠炎还是结肠癌的临床治疗手段均有限。植物天然产物活性成分的开发是目前

结肠炎和结肠癌临床新药研究的热点。此外，氢的同位素氘与细胞内氧化应激活性

有关，氘含量低的水可能有助于癌症的辅助治疗。

植物来源的天然产物是新药开发的重要途径之一，本课题关注到三萜类天然产

物在植物中广泛存在，具有抗炎、抗肿瘤等优良的生物活性。为了进一步探究这些

天然产物的生物活性和成药性，本研究以斑马鱼为模式动物，分别构建了断尾炎症

模型、脂多糖炎症模型和结肠癌细胞异体移植模型，探究了两个三萜天然产物——

白桦脂醇和胡黄连葫芦烷四环三萜皂苷（CTTs）针对动物个体的抗炎和抗肿瘤活性。

同样，依托斑马鱼癌症细胞的异种移植模型对低氘水的抗肿瘤活性进行了评价，探

究了三者对结肠炎相关性结肠癌的潜在治疗作用。此外，针对CTTs潜在的促肠动

力活性，构建了斑马鱼肠蠕动模型。实验结果如下：

1.白桦脂醇在两种斑马鱼炎症模型中均能显著抑制炎症诱导中性粒细胞和巨噬

细胞的增殖作用，抑制上述两种炎症细胞向炎症部位的迁移，抑制炎性细胞因子

TNF-α、IL-1β和IL-6相关基因的表达，证实白桦脂醇具有优良的抗炎活性。150-

200µM白桦脂醇在斑马鱼癌细胞异种移植模型中，可以显著抑制结直肠癌SW480、

SW620细胞在斑马鱼移植部位的增殖，其抑制作用效果与抗肿瘤药物顺铂基本持平。

此外，相比较SW620，白桦脂醇对低迁移能力的SW480细胞系的增殖抑制效果更

加显著。

2.胡黄连葫芦烷四环三萜皂苷是胡黄连重要的次生代谢物。研究显示，CTTs

可以显著抑制斑马鱼炎症模型中中性粒细胞和巨噬细胞的增殖以及向炎症部位的迁

移，并有效降低了TNF-α、IL-1β和IL-6促炎因子基因的表达，具有较好的抗炎活

性；但是，不同于白桦脂醇，CTTs在斑马鱼癌细胞异种移植模型上未表现对肿瘤

细胞增殖的抑制；此外，CTTs处理斑马鱼可促进其肠蠕动，加快了尼罗红染料的排

出，证明CTTs具有增强胃肠动力的作用，提示其可能具有缓解便秘的功效。

3.为了评价低氘水对斑马鱼模型的影响，本文应用了25、45、85和125ppm四

I

个浓度的低氘水，在斑马鱼炎症模型和肿瘤异体移植癌症模型中评价了其抗炎和抗

肿瘤活性。不同氘含量的水培养斑马鱼均未表现出明显的毒性和致畸性，但2dpf胚

胎向幼鱼孵化的孵化率随氘含量的减少呈现下降趋势，提示低氘水一定程度上延缓

了胚胎的孵化，可能具有延缓衰老的作用。低氘水处理并未显著改变斑马鱼炎症模

型中中性粒细胞和巨噬细胞的增殖以及向炎症部位的迁移，不具有明显的抗炎活性。

低氘水处理癌细胞异种移植模型时，不同氘含量的水对SW480细胞未表现出显著的

增殖抑制作用，但是25ppm低氘水对SW620细胞表现出一定的抑制增殖活性，提

示低氘水对肿瘤具有一定的抑制活性，但是其抑制效果可能针对不同肿瘤具有异质

性。

综上所述，得出结论：1.白桦脂醇、胡黄连葫芦烷四环三萜皂苷和低氘水对机

体的毒性较小。2.白桦脂醇和CTTs具有较好的抑制炎症的活性。3.白桦脂醇和低

氘水均具有抗肿瘤活性，其中白桦脂醇针对结直肠癌SW480、SW620具有较好的

抑制增殖活性，而低氘水只在25ppm极低的水平表现出对SW620细胞增殖的抑制。

4.CTTs具有增强胃肠动力的活性。这些结果显示上述两种天然活性产物和低氘水均

生物安全性较好，且均表现出良好的生物活性，具有较好的药物和功能食品开发潜

力。

关键词：斑马鱼；三萜天然产物；低氘水；抗炎活性；抗肿瘤活性

II

目录

中文摘要I

ABSTRACTIII

1绪论1

1.1炎症与癌症的关系1

1.2三萜天然产