发酵过程的控制PPT课件.pptx

第七节溶解氧对发酵的影响及控制;主要内容：

氧对发酵的影响

微生物对氧的需求

发酵过程氧的传质理论

溶氧浓度的变化及其控制手段

;本节要求;发酵罐的温度传感器、耐高温pH和溶氧传感器;好气性微生物的生长发育和代谢活动都需要消耗氧气，它们只有氧分子存在情况下才能完成生物氧化作用。因此，供氧对需氧微生物是必不可少的，在发酵过程中必须供给适量无菌空气，才能使菌体生长繁殖、积累所需要的代谢产物。而需氧微生物的氧化酶系是存在于细胞内原生质中，因此，微生物只能利用溶解于液体中的氧。

溶氧(DissolvedOxygen,DO)是需氧微生物生长所必需的。在发酵过程中有多方面的限制因素，而溶氧往往是制约发酵进行的重要限制因素。

;氧是一种难溶于水的气体。在25℃，105Pa条件下，空气中的氧在水中的溶解度为0.25mmol/L，在发酵液中的溶解度只有0.22mmol/L，而发酵液中的微生物生长的需氧量为25-50mmol/L·h。因此，在正常情况下，只够维持20-50s，水中的氧便会耗尽。

所以，供氧对于好氧微生物来说是非常重要的。在对数生长期，即使发酵液被空气饱和，此时若停止供氧，发酵液中溶解氧在几分钟之内便被耗尽。

对于好氧发酵，溶解氧浓度是最重要的控制参数之一。氧的不足会造成微生物代谢异常，产量降低。因此，处理好需氧发酵过程中供氧与需氧之间的关系，极为重要。

;一、溶氧对发酵的影响

氧对微生物发酵的影响是多方面的，不同的菌、不同的发酵阶段对于氧的要求也不相同，氧对其的影响也不相同，表现如下：

1、影响菌系的酶活性

在微生物的代谢过程中，许多参与催化脱氢氧化反应的酶都是以NAD(P)为辅酶的，NAD(P)的数量是保证酶活力的基础。NAD(P)作为H的受体，脱氢后成为还原的NAD(P)H。NAD(P)H只有在有氧条件下才能通过呼吸链被氧化，生成氧化型NAD(P)后又重新参加脱氢反应，一旦发酵液中的氧的浓度不够，与NAD(P)相关的酶促反应就会停止。;2、影响代谢途径

底物氧化需要大量的氧：

C6H12O6+6O2→6H2O+6CO2+?E

氧的存在是TCA循环能够进行的基础，缺氧必然导致???酮酸的积累。丙酮酸的积累，导致乳酸的形成，使代谢方向发生改变。

例1：谷氨酸、谷氨酰胺、精氨酸和脯氨酸等氨基酸在菌体呼吸充足的条件下产量最大。如果供氧不足，氨基酸合成就会受到强烈抑制，大量积累乳酸和琥珀酸。

例2：天冬酰胺酶的发酵中，前期是好氧发酵，而后期转为厌氧发酵，酶的活力就能大为提高。实验研究表明，当溶氧下降到45％时，就从好氧发酵转为厌氧发酵，酶的活力可提高6倍，这就说明利用控制溶氧来控制发酵的重要性。;【例】：

在GA(谷氨酸)发酵的合成期，过量供氧会使NADPH（还原型辅酶Ⅱ）进入呼吸链被氧化，减少了其数量，而NADPH与α-KGA（α-酮戊二酸）的还原氨基化是相偶联的，必然会影响α-KGA→GA的合成。;在实际生产过程：

溶解氧浓度过低→代谢异常，产量降低；

溶解氧浓度过高→代谢异常，菌体提前自溶。

结论：发酵过程溶氧浓度不能过低，但也并非越高越好！;二、微生物对氧的需求;(二)微生物呼吸强度与溶解氧的关系;若在临界氧浓度以下，微生物的呼吸速率会随溶解氧浓度的降低而显著下降，细胞处于半厌氧状态，代谢活动受到阻遏。

当不存在其他限制性因素，溶氧浓度高于临界值时，细胞的比耗氧速率Qo2（呼吸强度）将保持恒定。

;注意点：;要使发酵正常进行，必须维持培养液的溶解氧浓度在CCr以上。

一般好氧微生物的临界氧浓度很低，CCr约为0.003～0.05mmol/L，或者等于1～15%氧饱和浓度（亦称氧的满足度）。;C;由上述可知，只有使溶氧浓度高于其临界值，才能维持菌体的最大比摄氧率，得到最大的菌体合成量。如果溶氧浓度低于临界值，则菌体代谢受到干扰。

但是，发酵工业的目的往往是要得到菌体的发酵产物而不是菌体本身。供氧对产物形成可能产生以下影响：

（1）由溶氧浓度小于临界值（氧饥饿）而引起的细胞代谢干扰，可能对形成某些产物造成不利（或有利）的作用；

（2）当提供的溶氧浓度大于临界值时，对菌体生长无妨碍，同时有可能刺激（或抑制）产物的形成。

所以，某种产物形成的最佳通气条件可能不同于菌体生长的最佳通气条件。;发酵过程中，呼吸临界氧浓度还与培养液的理化性质、发酵罐的结构有关。

;注意点：;例：;（三）影响微生物需氧