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生物化学实验室技术应用练习题（附答案）

一、选择题

（一）单项选择题

1.下列哪种技术常用于测定蛋白质的分子量？

A.离子交换层析

B.亲和层析

C.凝胶过滤层析

D.疏水作用层析

答案：C。凝胶过滤层析是根据蛋白质分子大小进行分离的技术，可用于测定蛋白质的分子量。离子交换层析主要根据蛋白质的电荷性质分离；亲和层析是利用蛋白质与配体的特异性亲和力分离；疏水作用层析基于蛋白质表面的疏水性差异分离。

2.在PCR反应中，引物的作用是：

A.提供模板

B.激活TaqDNA聚合酶

C.提供3-OH末端供DNA合成

D.增加反应的特异性

答案：C。引物是一小段单链DNA或RNA，它能与模板DNA的特定区域互补结合，为DNA聚合酶提供3-OH末端，使DNA合成得以起始。模板是待扩增的DNA分子；TaqDNA聚合酶本身具有活性，引物不能激活它；虽然引物对反应特异性有影响，但主要作用是提供合成起点。

3.下列关于SDS-PAGE的说法，错误的是：

A.SDS能使蛋白质解离成亚基

B.SDS能与蛋白质结合，使蛋白质带负电荷

C.蛋白质在SDS-PAGE中的迁移率只与分子量有关

D.SDS-PAGE可用于测定蛋白质的等电点

答案：D。SDS-PAGE（十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳）中，SDS能使蛋白质解离成亚基，并与蛋白质结合，使蛋白质带上大量负电荷，此时蛋白质在电场中的迁移率主要取决于分子量大小。而测定蛋白质等电点通常使用等电聚焦电泳，不是SDS-PAGE。

4.双缩脲法测定蛋白质含量的原理是：

A.蛋白质中的肽键与双缩脲试剂反应产生紫色络合物

B.蛋白质中的酪氨酸与双缩脲试剂反应

C.蛋白质中的色氨酸与双缩脲试剂反应

D.蛋白质中的氨基与双缩脲试剂反应

答案：A。双缩脲法是基于蛋白质中的肽键在碱性条件下能与双缩脲试剂中的铜离子反应，生成紫色络合物，通过比色测定蛋白质含量。酪氨酸和色氨酸主要参与酚试剂法（Lowry法）等的反应；氨基与双缩脲试剂反应并非双缩脲法的原理。

5.下列哪种物质可用于沉淀蛋白质？

A.乙醇

B.氯化钠

C.葡萄糖

D.蔗糖

答案：A。乙醇等有机溶剂可以降低蛋白质的溶解度，使蛋白质沉淀。氯化钠在低浓度时可增加蛋白质的溶解度（盐溶），高浓度时可使蛋白质沉淀（盐析），但这里更符合的是乙醇；葡萄糖和蔗糖一般不用于沉淀蛋白质。

6.用于DNA测序的Sanger法中，加入的ddNTP的作用是：

A.作为DNA合成的原料

B.终止DNA链的延伸

C.增加DNA合成的速度

D.提高DNA合成的准确性

答案：B。Sanger法测序中，ddNTP（双脱氧核苷酸）与dNTP（脱氧核苷酸）竞争掺入正在合成的DNA链，但由于ddNTP缺乏3-OH，当它掺入后，DNA链的延伸就会终止，从而得到一系列不同长度的DNA片段，通过电泳分离和检测可确定DNA序列。

7.凝胶电泳分离核酸时，核酸分子向哪个电极移动？

A.正极

B.负极

C.不移动

D.随机移动

答案：A。核酸分子是带负电荷的生物大分子，在电场中会向正极移动。

8.下列关于酶活性测定的说法，正确的是：

A.测定酶活性时，底物浓度越高越好

B.测定酶活性时，温度和pH应保持恒定

C.酶活性测定不需要设置对照

D.酶活性的单位是克

答案：B。测定酶活性时，温度和pH会显著影响酶的活性，因此应保持恒定。底物浓度并非越高越好，过高的底物浓度可能会产生底物抑制等现象；酶活性测定需要设置对照，以排除非酶促反应等因素的干扰；酶活性的单位常用国际单位（IU）等表示，不是克。

9.亲和层析中，与载体共价结合的是：

A.蛋白质

B.配体

C.抗体

D.抗原

答案：B。亲和层析是利用生物分子间的特异性亲和力进行分离的技术，载体上共价结合配体，待分离的蛋白质等生物分子能与配体特异性结合，从而实现分离。抗体和抗原可以作为配体，但这里说的是与载体结合的通用物质是配体。

10.下列哪种技术可用于检测基因的表达水平？

A.Southernblotting

B.Northernblotting

C.Westernblotting

D.ELISA

答案：B。Northernblotting用于检测RNA的含量和大小，可反映基因的表达水平，因为基因表达会转录成RNA。Southernblotting主要用于检测DNA；Westernblotting用于检测蛋白质；ELISA是一种检测抗原或抗体的免疫分析方法。

（二）多项选择题

1.下列属于蛋白质分离纯化技术的有：

A.盐析

B.电泳

C.透析

D.离心

答案：ABCD。盐析是通过改变盐浓度使蛋白质沉淀从而分离；电泳是利用