DNA的复制-基因突变课件.ppt

基因突变;遗传物质的结构改变而引起的遗传信息改变，均可称为突变。

从分子水平来看，突变就是DNA分子上碱基的改变。

在复制过程中发生的DNA突变称为DNA损伤(DNAdamage)。;突变是进化、分化的分子基础

突变导致基因型改变

突变导致死亡

突变是某些疾病的发病基础;突变的概念和类型

突变(mutation)——在基因组的某一特定区域核苷酸序列发生改变而引起的基因型稳定的可遗传的永久性的改变

突变体(mutant)——基因发生突变的生物体

野生型：未发生基因突变的个体;突变的类型;DNA的复制-基因突变;按突变的结果可分为：

同义突变：没有改变产物氨基酸序列的密码子，不会导致产物的氨基酸组成改变

错义突变：改变了产物氨基酸的组成

无义突变：碱基的改变使某种氨基酸的密码子变成了终止密码，使肽链合成提早终止;按突变效应是背离或返回野生型可分为：

正向突变：改变了野生型性状的突变

回复突变：突变体所失去的野生型性状可以通过第二次突变得到恢复，则第二次突变称为回复突变;突变产生的原因;自然发生：

DNA复制错误

碱基互变异构体的存在

自发的脱嘌呤、脱氨基作用

氧化作用损伤碱基

转座子的作用等等;诱发突变：

物理因素——放射线，包括紫外线、X射线、γ射线等

化学因素——碱基类似物、碱基修饰剂、DNA插入剂等

生物因素——病毒、细菌等;基因的人工诱变

化学方法：使用化学诱变剂.如亚硝酸,硫酸二乙酯等.

物理方法：如X射线,γ射线,紫外线,激光等.

可用于人工诱变育种、基因工程、转基因动物等;DNA的复制-基因突变;突变的分析检验;在人群中，各个体基因的核苷酸序列会存在一定差异，称为基因多态性。

特定的多态性片段与某些特殊的生理现象紧密联系，如疾病等，这一多态性片段称为“遗传标记”。

基因多态性是个体的“身份证”；有的虽然不表现疾病，但也许会影响对药物的反应和用药效果。

基因多态性分析技术广泛应用于群体遗传学研究、疾病连锁分析和关联分析、疾病遗传机制研究、肿瘤易感性研究、个性化用药等诸多方面。;遗传标记分析：

第一代：限制性酶切片段多态性(restrictionfragmentlengthpolymorphism,RFLP)，单个碱基的缺失、重复及插入引起了限制性内切酶位点的变化，导致DNA片段长度的变化。

第二代：DNA重复序列的多态性，特别是短串联重复序列，如小卫星DNA和微卫星DNA，并主要表现于重复序列拷贝数的变异。

第三代：单核苷酸多态性分析(singlenucleotidepolymorphism,SNP)，散在的单个碱基的不同，包括单个碱基的缺失和插入，但更多的是单个碱基的置换，是目前最受关注的多态性分析。;限制片段长度多态性分析;DNA的复制-基因突变;·单链构象多态性分析;SSCP分析对DNA序列的改变非常敏感，常常一个碱基差别都能显示出来。SSCP结果判定是通过多个样品之间对比，观察条带之间位置改变，从而显示出不同生物个体的DNA特异性，达到指纹分析的目的。

该技术已被广泛用于癌基因和抗癌基因变异的检测、遗传病的致病基因分析以及基因诊断、基因制图等领域。

;PCR的基本原理;DNA的复制-基因突变;SNP分析技术按其研究对象主要分为两大类：

对未知SNP进行分析,即找寻未知的SNP或确定某一未知SNP与某遗传病的关系。多种方法可以使用，如温度梯度凝胶电泳(TGGE)、变性梯度凝胶电泳(DGGE)、单链构象多态性(SSCP)、限制性片段长度多态性(RFLP)、随机扩增多态性DNA(RAPD)等，如需确知突变的位置和碱基类别，须对那些含有SNP的DNA链进行测序。

对已知SNP进行分析，即对不同群体SNP遗传多样性检测或在临床上对已知致病基因的遗传病进行基因诊断。筛查已知SNP的方法有等位基因特异寡核苷酸片段分析(ASO)、突变错配扩增检验(MAMA)、基因芯片技术(genechips)等。;许多物种基因组已检测并建立了大量数据库，比较这些来自不同实验室不同个体的序列，就可以检测到SNP。

一些可供利用的公开SNP网上资源，如：

美国国立卫生研究院(NationalInstitutesofHealth,NIH)提供的与癌症和肿瘤相关的候选SNP数据库：http://cgap.nci.nih.gov/GAI；

NIH开辟的适于生物医学研究的dbSNP多态性数据：http://www.ncbi.nlm.nih.gov/SNP；

德国的HGBAS网站提供的人类SNP数据库：http://hgbas.Cgr.