开发的一些原则和技巧.docVIP

个人经验：

1）先看分子量和分子结构；

2）根据分子量大小选色谱柱（分子量超过1W的分子选300A的柱子，小于1W选120A的就用了；

3）先在C18柱子上花至少30min0～100％甲醇的梯度，看看化合物在C18上面的保留能力；

4）再根据出峰的时间，进一步调整，总的规则是，先把目标化合物的峰让它跑出来，并要求获得重现性，调整好出峰时间；然后再调整好峰形，使其峰形对称性良好。

有两种情况下需要考虑加缓冲盐溶液：

1）在极端条件下如纯水条件下，峰还是出来太快，这个时候就需要加入缓冲盐，然后再调节pH来考查pH对样品保留时间的影响；

2）峰出来了，但是峰形比较差，前拖或后拖，这个时候也需要考虑加入缓冲盐溶液，通常加入浓度为50mmol/L时认为缓冲盐的量应该是足够大了，但仍需视情况来定；加入缓冲盐后如果峰形还是不太好，还需要进一步的考查pH的影响。

这两个方面如果能结合分子结构进行调整，并加以经验总结，将会事半功倍。