果胶寡糖缓解小鼠肝脏脂肪变性的作用及相关机制研究.pdfVIP

果胶寡糖缓解小鼠肝脏脂肪变性的作用及相关机制研究

摘要

目的：肥胖以及相关的代谢综合征已经成为全球性的公共健康问题。肥胖形成

以及减肥过程均与肠道菌群密切相关且相互影响，作为常规疗法的补充或替代，开

发肠道微生态治疗策略尤为关键。因此越来越多研究聚焦于益生元在肥胖中的应用。

本文拟利用酶解法制备果胶寡糖（POS），在高脂饮食诱导小鼠模型中评估其抗肥

胖作用，并对其机制进行探究。

方法：将健康的C57BL/6J小鼠（18–20g）随机分为正常饮食组（NCD）、高

脂饮食模型组（HFD）和POS补充组（HFD+POS）。高脂饮食造模周期为4周，

期间每天观察小鼠，记录体重、摄食量、饮水情况，并在第5周开始给予200

mg/kg/天POS持续8周，在最后一周收集粪便，在进行腹腔葡萄糖注射实验后处死。

取结肠、肝脏、附睾脂肪，拍照记录并测量重量；使用HE染色观察肝脏和结肠

组织结构病理变化；使用Oil-Red染色观察肝脏中脂质沉积；使用Alcianblue染色

观察结肠组织中杯状细胞分泌粘蛋白的情况。采用RT-qPCR检测肠道紧密连接蛋

白的mRNA表达水平；通过蛋白免疫印迹法检测肠道紧密连接蛋白的蛋白质含量；

ElisaIL-1βIL-6IL-10TNF-αALTAST

用测定血清中炎症因子、、、，肝脏中和、

TC、TG的含量；使用宏基因组测序技术检测小鼠肠道菌群的变化，并进行KEGG

以及GO通路富集分析；

结果：HFD组小鼠的体重在高脂饮食12周后显著高于NCD组（P0.001）,

而高脂饮食同时给予POS则有效缓解了高脂饮食引起的体重增加（P0.05）。减

轻白色脂肪组织重量。肝脏组织病理学检查显示：HFD组肝脏炎性浸润，脂肪变

POS

性、肝细胞气球样变。补充有效减轻这种病理变化。并减轻肝脏中脂质积累，

NCDHFDTNF-αIL-1β

降低肝脏功能损伤标志物水平。与组相比，组小鼠血清、和

IL-6含量显著增加，补充POS则显著降低了促炎细胞因子的含量，有效缓解系统

性炎症水平。结肠组织病理学显示，相比于HFD组，HFD+POS组中黏膜上皮完

整性增强和炎性细胞浸润减少。POS补充恢复了高脂饮食诱导的结肠中紧密连接蛋

白ZO-1、Occludin和Claudin-1（P0.01）的基因转录水平的降低，并增加了蛋白

质表达量，增强肠道屏障功能。肝脏中PPAR-γ信号通路下游脂质代谢相关基因转

录水平增强。通过宏基因组数据分析筛选出差异表达菌株，POS改变的某些特定物

种或属的相对丰度。使用KEGG数据库中注释的总读长对代谢途径部分进行线性

判别分析。发现POS的作用与肠道菌群的氨基酸代谢有重要关系。通过斯皮尔曼

相关性分析发现肠道菌群与体重、炎症因子、肠道紧密连接蛋白等具有显著相关性。

I

结论：本研究表明POS在肥胖小鼠模型中能够通过减轻高脂饮食诱导的体重

增加和肝脏脂肪变性，增强肠道屏障功能，重塑肠道菌群来预防辅助缓解肥胖，鉴

于其具有广泛的生物材料来源，具有开发成为肥胖人群益生元制品的潜力。

硕士研究生：于胜男（特种医学）

指导教师：李尚勇（副教授）

关键词：肥胖；肝脏脂肪变性；肠道菌群；益生元；

II

EffectsofPecticOligosaccharidesonAlleviatingHepaticSteatosisin

MiceandRelatedMechanisms