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摘要
葡萄(VitisviniferaL.)是多年生藤本植物,在我国栽培历史悠久,是感染病毒最多
的果树树种之一,且一株葡萄可以同时被多种病毒复合侵染。葡萄浆果内坏死病毒
(grapevineberryinnernecrosisvirus,GINV)会导致果实产量、外观及内在品质严重下
降。本研究以‘克瑞森无核’(Vitisvinifera‘Crimsonseedless’)、‘红地球’(Vitisvinifera
‘RedGlobe’Vitislabrusca×vinifera‘Kyoho’Nicotiana
)和‘巨峰’()葡萄果实以及本生烟(
benthamiana)叶片为试验材料,旨在探究GINV病毒侵染对葡萄果实有机酸代谢及本生
烟叶片叶绿素荧光特性的影响。本研究的主要结果如下:
(1)通过转录组测序得到感染GINV后‘克瑞森无核’葡萄果实的1700个差异表
Differentlyexpressedgenes,DEGs846DEGs854DEGs
达基因(),其中个显著上调,个
显著下调,绝大多数DEGs表达量为中等水平。DEGs主要富集在有机酸代谢、光合作
GINV7d
用等途径;‘红地球’和‘巨峰’葡萄果实在接种侵染性克隆后第表现出明
显坏死斑,均检测出GINV编码的外壳蛋白(Coatprotein,CP)基因,且果实中GINV
病毒量随着感染时间的延长而下降。GINV侵染过程中‘红地球’果实中酒石酸、柠檬
酸以及α-酮戊二酸含量无明显变化,与对照组相比苹果酸含量轻微升高;‘巨峰’果实
中酒石酸和草酰乙酸含量无明显变化,与对照组相比苹果酸含量轻微降低;‘红地球’
和‘巨峰’果实中苹果酸脱氢酶活性变化明显,酶活随着感染时间的延长低于对照,异
柠檬酸脱氢酶活性在感染GINV后活性下降;感染GINV的‘巨峰’葡萄中苹果酸酶和
顺乌头酸酶活性显著增强。GINV侵染导致‘红地球’和‘巨峰’葡萄果实可溶性固形
物和可滴定酸含量下降;糖类物质含量下降,但随着感染时间的延长,糖类物质含量逐
Malatedehydrogenase,MDH
渐上升。‘红地球’果实中苹果酸合成基因苹果酸脱氢酶()
基因在感染GINV后第7d与对照相比显著上调表达,NADP-苹果酸酶(NADP-Malic
enzyme,NADP-ME)基因显著下调表达,苹果酸含量略微上升;‘巨峰’果实中苹果酸
脱氢酶活性与对照相比显著下降,苹果酸酶活性显著增强,MDH基因显著下调表达,
NADP-ME基因显著上调表达,有机酸运输基因线粒体丙酮酸转运载体(Mitochondrial
pyruvatecarrier,MPC)基因显著下调表达,苹果酸含量显著下降。葡萄果实可能通过调
控体内苹果酸含量来抵抗GINV病毒,苹果酸参与了葡萄果实对GINV的防卫反应。
I
(2)本生烟叶片在接种GINV侵染性克隆后第7d出现明显褪绿斑;侵染叶叶片检
测到CP基因,系统叶叶片未检测到,表明GINV病毒未引起本生烟系统侵染;叶片中
GINV病毒量随着感染时间的延长而下降。在GINV侵染过程中本生烟叶片相对电导率
和叶绿素相对含量在感染前期均低于对照,感染后期逐渐高于对照;本生烟叶片色素含
量变化不明显,色素含量略微下降。在GINV侵染过程中本生烟叶片叶绿素荧光参数值
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