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食品快速检测技术
项目九食品中微生物的快速检测1.菌落总数的快速检测1.1菌落总数的检测方法1.2纸片法测定鲜奶中的菌落总数
情景导入对人体造成的危害较大具有更快速、更便捷、更精准等特点有效提高检测人员的工作质量和工作效率,不仅有利于保障流入市场的食品安全,更便于食品企业加强安全监督,从而推动企业的可持续发展。
1.菌落总数的检测方法菌落总数是指示性微生物,非致病菌,主要用来评价食品清洁度,反映食品在生产过程中是否符合卫生要求,菌落总数的多少在一定程度上标志着食品卫生质量的优劣。若食品菌落总数超标,意味着食品受到微生物致病菌污染的概率会大大增加,所以食品安全法对菌落总数有着严格的要求,生产企业食品菌落总数超标则会面临严重处罚。1.菌落总数的意义
1.菌落总数的检测方法菌落总数是指食品检样经过处理,在一定的条件下培养后,所得到的每单位食品(1g、1mL、1cm2)中所含细菌菌落的总数。由于菌落总数测定是在需氧条件下进行的,而且不能区别细菌种类,因此,菌落总数又称为需氧菌数或杂菌数,菌落总数测定的是活菌数,现在通常用CFU/(g、mL、cm2)表示。2.菌落总数的概念
1.菌落总数的检测方法(1)常用检测方法《食品安全国家标准食品微生物学检验菌落总数测定操作过程较为复杂,检测周期长,具有较大的滞后性。3.菌落总数的检测方法平板计数法样品制备样品稀释接种培养菌落计数结果报告平板计数法检验流程
1.菌落总数的检测方法(2)常用快速检测方法-即用型纸片法目前最常用的菌落总数快速检测方法3.菌落总数的检测方法
1.菌落总数的检测方法(3)其他快速检测方法①ATP生物荧光法ATP普遍存在于一切活细胞中,成为检测样品中有无微生物的极佳依据。反应机理:荧光素酶以荧光素、ATP和O2为底物,在Mg2+的催化下,将化能转化成光能,发出光量子。在一定范围内,ATP的浓度与发光强度呈线性关系,通过发光光度计就可以检测出样品中的ATP的含量,进而推断菌落总数。在不增菌的情况下,最短可在几十秒内完成一个样本的测定。3.菌落总数的检测方法
1.菌落总数的检测方法(3)其他快速检测方法②阻抗法检测原理:根据微生物生长代谢将培养基中蛋白质和碳水化合物转变为氨基酸及乳酸等,引起培养基电阻抗微弱变化,可由阻抗检测仪器记录成DT值。DT值与样品微生物污染程度在一定范围内存在相关关系。建立标准曲线及回归方程。并利用标准曲线和回归方程,通过测定样品DT值,计算出样品菌落总数。3.菌落总数的检测方法
1.菌落总数的检测方法(3)其他快速检测方法③近红外光谱法近红外光(波长在780~2526nm的电磁波)主要对含有氢基团X-H(X=C/N/O)振动的倍频和合频吸收。当近红外光照射待测物质时,频率相同的光线和基团将发生共振现象,光的能量通过分子偶极极矩的变化传递给分子;频率不同时,该红外光就会被吸收。因此,通过监测分析连续改变频率的近红外光照射样品的透射或反射光线,就可确定该组分的含量,从而确定其菌落总数。3.菌落总数的检测方法
项目九食品中微生物的快速检测1.菌落总数的快速检测1.1菌落总数的检测方法1.2纸片法测定鲜奶中的菌落总数
2.纸片法测定鲜奶中的菌落总数即用型纸片法最常用的菌落总数快速检测方法1.菌落总数的常用快速检测方法
2.纸片法测定鲜奶中的菌落总数1.即用型纸片法定义:以凝胶、无纺布和滤纸三种主流载体代替琼脂作为培养基载体培养微生物的一种检测新技术。特点:操作简单、分析时间短、易于运输保存、成本低廉,准确度和精确度高,避免了热琼脂法不适宜受损细菌恢复的缺陷,非常适合于实验室及现场检测。
2.纸片法测定鲜奶中的菌落总数1.即用型纸片法原理:一种预先预备好的培养基系统,含有标准的培养基,冷水可溶性的凝胶剂和氯化三苯四氮唑(TTC)指示剂,菌落在测试片上呈红色或粉红色,这样可增强菌落计数效果。
2.纸片法测定鲜奶中的菌落总数1.即用型纸片法使用方法:首先将纸片静置,直到其恢复至常温。然后制备样液,使用1mL灭菌吸管吸取样液到纸片上,盖上透明覆盖膜,静置1min后培养,菌落计数和结果计算均按照说明书的要求进行。样品制备样品稀释接种培养菌落计数结果报告测试片法检验流程接种
2.纸片法测定鲜奶中的菌落总数2.任务实施操作准备1.检测器材:10mL和1mL无菌吸管、试管架、记号笔、培养
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