唐古特大黄多糖的提取纯化、结构表征及生物活性研究.pdfVIP

摘要

大黄是一种传统的中草药，唐古特大黄是大黄的主要来源之一。然而对于唐古

特大黄来说，现有研究主要集中在蒽醌类、大黄酸等成分上，对其多糖的结构和生

物活性的研究却较为有限。另外，在我国炎性肠病患病人数逐年攀升，探寻如何缓

解和治疗炎性肠病是十分必要的。本文从唐古特大黄中提取多糖，将纯化后将其命

名为RTP，初步探究了其结构并研究了体外抗氧化活性以及体内抗炎活性。结论：

（1）在单因素实验的基础上通过响应面实验优化唐古特大黄多糖的提取工艺。最佳

提取工艺条件下为提取时间3.2h，提取温度83℃，料液比1∶22，在此条件下多糖

的提取率达到2.94±0.13％。（2）经过Sevage、D101大孔树脂和透析袋（8000-14000

kDa）初步纯化的多糖，粗多糖以20mg/mL的上样量通过SephadexG-200层析柱，

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得到分子量为1.84×10Da的单一多糖组分：RTP。其多糖、蛋白、还原糖以及糖醛

酸的含量分别为95.17±1.44%、1.82±0.25%、3.76±0.56%、20.56±1.12%。（3）利用大

型仪器分析得出RTP是具有α-糖苷键和β-糖苷键的吡喃型酸性多糖，主要由阿拉伯

糖（26.90%）、半乳糖（25.52%）、半乳糖醛酸（23.36%）、葡萄糖（16.72%）组成，

还有少量的鼠李糖（2.93%）、甘露糖（1.90%）、木糖（1.60%）和葡萄糖醛酸

（1.07%）。RTP中的糖苷键键型包括非还原末端糖苷或1,6→糖苷键、1,2→、

1,2,6→、1,4→、1,4,6→等可氧化的糖苷键。此外RTP还具有三螺旋结构。（4）RTP

在体外能够清除DPPH自由基、·OH、O2·-、ABTS自由基，有良好的体外抗氧化效

果。（5）以3%DSS诱导小鼠构建结肠炎模型，经过RTP干预（低剂量100mg/kg，

高剂量300mg/kg），炎症情况都有所改善，结肠表面黏膜有不同程度的修复，与

DSS组相比隐窝更加规则，杯状细胞增多。结肠组织中的抗氧化酶（CAT、SOD、

GSH-px）的活力增强，氧化应激标志物（MDA）和中性粒细胞浸润的标志物

（MPO）减少。血清当中的抗炎性细胞因子（IL-10）分泌量增多，促炎性细胞因子

（IL-6、IL-1β和TNF-α）水平降低。用RT-qPCR检测了notch1、hes1、jagged1、

math1、NF-κBp65和TLR4的mRNA表达水平，推测RTP可能是通过Notch或NF-

κB途径缓解小鼠结肠炎。肠道菌群多样性分析发现RTP能够提高小鼠肠道内的微生

物多样性、调整菌群结构，这可能是RTP发挥抗炎作用的另一途径。

关键词：多糖；抗氧化活性；抗炎活性；结肠炎

ABSTRACT

RheumisatraditionalChineseherbalmedicine,andRheumtanguticumisoneofthe

mainsourcesofit.ForR.tanguticum,existingstudieshavemainlyfocusedonits

componentssuchasanthraquinonesandrhubarbacids,whilestudiesonthestructureand

biologicalactivityofitspolysaccharidesaremorelimited.Inaddition,thenumberof

peoplesufferingfromIBDisincreasingyearbyyearinChina,soitisnecessarytoexplore

howtoalleviateandtreatIBD.Inthispaper,polysaccharideswereextractedfromRheum