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转录的终止RNA聚合酶释放,RNA链释放,DNA恢复成双螺旋状态**第30页,共73页,星期日,2025年,2月5日RNA转录合成的终止机制有两种:1.依赖Rho因子的转录终止:由终止因子(ρ因子)识别特异的终止信号,并促使RNA的释放。2.非依赖Rho的转录终止**第31页,共73页,星期日,2025年,2月5日依赖Rho因子的转录终止**第32页,共73页,星期日,2025年,2月5日非依赖Rho的转录终止**第33页,共73页,星期日,2025年,2月5日第三节转录机器的主要成分一、RNA聚合酶RNA聚合酶主要以双链DNA为模板;RNA聚合酶是转录过程中最关键的酶;每个细胞中约有7000个RNA聚合酶;任何时候大约2000~2500个核心酶执行转录功能。**第34页,共73页,星期日,2025年,2月5日催化中心ββ′α:参与核心酶组装及启动子识别全酶α2ββ′ωσ核心酶α2ββ′ωσ亚基--识别模板链并与启动子结合使转录起始,在转录延伸阶段,σ亚基与核心酶解离,仅由核心酶参与延伸过程。1、原核生物RNA聚合酶与模板DNA、底物NTP及新生RNA链结合**第35页,共73页,星期日,2025年,2月5日核心酶可以DNA为模板合成RNA,但不能在正确的位点起始。起始必须有σ因子;σ因子能够提高酶和启动子识别的特异性,同时也降低酶和非特异位点的亲和力。σ因子因子基因功能σ70rpoD广泛σ32rpoH热休克σ54rpoN氮代谢**第36页,共73页,星期日,2025年,2月5日2、真核生物RNA聚合酶酶细胞内定位转录产物相对活性对α-鹅膏蕈碱的敏感程度RNA聚合酶I核仁rRNA50%~70%不敏感RNA聚合酶II核质hnRNA20%~40%敏感RNA聚合酶III核质tRNA约10%存在物种特异性**第37页,共73页,星期日,2025年,2月5日RNA聚合酶I的转录产物是45SrRNA,经剪接修饰后生成除5SrRNA外的各种rRNA。RNA聚合酶II在核内转录生成hnRNA,经剪接加工后生成成熟mRNA被运送到细胞质中作为蛋白质合成的模板。核不均一RNA(heterogeneousnuclearRNA,hnRNA):核内未被剪接的有内含子的mRNA前体,或是核内mRNA的初级转录产物。**第38页,共73页,星期日,2025年,2月5日RNA聚合酶III的转录产物是tRNA,5SrRNA,snRNA。SnRNA(smallnuclearRNA),即核内小RNA,主要存在于核内,是核内100~300个核苷酸序列的小型RNA,参与hnRNA的剪接。**第39页,共73页,星期日,2025年,2月5日转录因子(transcriptionfactor,TF):真核生物转录起始过程中,除RNA聚合酶之外的其它辅助因子统称为转录因子。**第40页,共73页,星期日,2025年,2月5日第四节启动子与转录的起始一、启动子区的基本结构启动子(promoter):是一段位于结构基因5’端上游区的DNA序列,能活化RNA聚合酶,使之与模板DNA准确地结合并具有转录起始的特异性。**第41页,共73页,星期日,2025年,2月5日转录单元(transcriptionunit):是一段从启动子开始到终止子结束的DNA序列,RNA聚合酶从转录起始位点开始沿着模板前进,直到终止子为止,转录出一条RNA链。转录起始位点:是指与新生RNA链第一个核苷酸相对应DNA链上的碱基,研究证实通常为一个嘌呤。**第42页,共73页,星期日,2025年,2月5日转录单元(transcriptionunit)起点(startpoint)上游(upstream)下游(downstream)**第43页,共73页,星期日,2025年,2月5日启动子区的基本结构细菌启动子特征:1、起点通常是一个嘌呤;2、起点上游10bp处,有一约6bp的保守区域,称为-10区(也叫PribnowBox),共有序列为:TATAAT;3、起点上游35bp处,有一约6bp的保守区,称为-35区,共有序列为:TTGACA;4、90%的启动子中,-10与-35区的距离在16-19bp之间;两个保守区之间的序列并不重要
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