烟草NtDEAH1基因的克隆、生信分析及功能验证.pdfVIP

2025年38卷1期西南农业学报

Vol.38No.1SouthwestChinaJournalofAgriculturalSciences23

引用格式：

王余，吴贵芝，崔帅，唐琴，谭永言，李长远，唐华江,杨豪，黄莺，刘仁祥.烟草NtDEAHI基因的克隆、生信分析及功能验证[J].西南农业学报，

2025,38(1):2330.

WangY,WuGZ,CuiS,TangQ,TanYY,LiCY,TangHJ,YangH,HuangY,LiuRX.Cloning,bioinformaticsanalysisandfunctionalverificationofNt-

DEAHIgeneinNicotianatabacum[JJ.SouthwestChinaJournalofAgriculturalSciences,2025,38(1):23-30.DOI:10.16213/j.cnki.scjas.2025.1.003.

烟草NtDEAHI基因的克隆、生信分析及功能验证

王余，吴贵芝，崔帅，唐琴，谭永言，

李长远，唐华江，杨豪，黄莺，刘仁祥

（贵州大学烟草学院/贵州省烟草品质研究重点实验室，贵阳550025）

摘要：【目的】探明烟草NtDEAHI基因的特异性表达、逆境胁迫响应模式及其对烟草叶片数的影响，为进一步研究NtDEAHI基因

调控烟草叶片数的分子机制提供理论依据。【方法】以烟草K326、韭菜坪2号和NC82为材料，利用PCR克隆NtDEAHI基因，运用

在线网站进行生物信息学分析，使用RT-qPCR方法分析该基因在不同器官（根、茎、叶）、不同发育时期（团棵－现蕾期）和不同胁

迫（于旱、盐、高温和低温胁迫）处理下的表达模式，利用遗传转化方法将过表达和敲除载体通过农杆菌转到烟草叶片中创制突变

体，研究该基因对烟草叶片数的影响。【结果】NtDEAHI基因是RNA解旋酶基因家族成员之一，CDS开放阅读框为2829bp，编码

942个氨基酸，分子质量为106.579kDa;NtDEAH1蛋白定位于细胞核，属于不稳定亲水性蛋白质；NtDEAHI基因在烟株生长发育

进程中的表达量呈先增后降趋势，在花芽分化期前最高，NC82相对表达量为27.45，韭菜坪2号的相对表达量为13.56;NtDEAH1

基因响应干旱、高温及低温胁迫，相对表达量随处理时间延长呈先升后降趋势，12h时叶中的相对表达量最高，于旱胁迫为7.04，

高温胁迫为8.42，低温胁迫为16.65；NtDEAH1基因敲除突变体的叶片数（韭菜坪2号33.33片，NC8226.67片）显著高于野生型

（韭菜坪2号27.67片,NC8219.67片），过表达株系的叶片数（韭菜坪2号19.67片,NC8215.67片）显著少于野生型（韭菜坪2

号27.67片，NC8219.67片）。【结论】本研究克隆获得NtDEAH1基因，其属于RNA解旋酶基因家族，能响应干旱、高温和低温逆

境胁迫，具有调控烟株生长发育和叶片数的功能。

关键词：烟草；NtDEAHI；叶片数；生物信息学分析；功能验证

中图分类号：S572文献标志码：A文章编号：1001-4829(2025)1-0023-08

Cloning,bioinformaticsanalysisandfunctionalverificationofNtDEAH1

geneinNicotianatabacum

WANGYu,WUGui-zhi,CUIShuai,TANGQin,TANYong-yan,LIChang-yuan,

TANGHua-jiang,YANGHao,HUANG