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siRNA管理师初级考试试卷与答案
一、单项选择题（每题2分，共20分）
1.siRNA的中文是？
A.小干扰RNAB.微小RNAC.长链非编码RNAD.环状RNA
2.以下哪种是siRNA作用机制中的关键蛋白？
A.DNA聚合酶B.解旋酶C.核酸酶D.Dicer酶
3.siRNA长度一般为？
A.10-15bpB.19-25bpC.30-40bpD.50-60bp
4.化学合成siRNA最常用的方法是？
A.固相合成法B.液相合成法C.酶促合成法D.体内合成法
5.转染siRNA进入细胞常用的方法不包括？
A.脂质体转染B.电穿孔C.显微注射D.离心法
6.siRNA主要作用于？
A.DNA复制B.转录起始C.转录后水平D.翻译后修饰
7.设计siRNA时，一般避免以下哪种情况？
A.富含A/TB.富含G/CC.有回文结构D.无特殊要求
8.储存siRNA干粉的合适温度是？
A.4℃B.-20℃C.-80℃D.室温
9.以下哪种细胞系常用于siRNA实验？
A.HeLa细胞B.心肌细胞C.神经干细胞D.红细胞
10.siRNA作用靶点一般位于？
A.启动子区域B.编码区C.内含子D.增强子
答案：1.A2.D3.B4.A5.D6.C7.C8.B9.A10.B
二、多项选择题（每题2分，共20分）
1.siRNA的特点有（）
A.双链RNAB.特异性强C.高效性D.可人工合成
2.影响siRNA转染效率的因素包括（）
A.细胞类型B.转染试剂C.siRNA浓度D.培养条件
3.以下哪些是siRNA的应用领域（）
A.基因功能研究B.疾病治疗C.药物研发D.植物育种
4.设计siRNA时需要考虑的因素有（）
A.序列特异性B.避免脱靶效应C.与mRNA结合能力D.二级结构
5.常用的siRNA转染试剂有（）
A.LipofectamineB.FugeneC.PEID.DMSO
6.检测siRNA干扰效果的方法有（）
A.qRT-PCRB.WesternblotC.细胞功能检测D.测序
7.siRNA与miRNA的区别在于（）
A.来源B.作用机制C.长度D.对基因表达的调控方式
8.保存siRNA溶液时需要注意（）
A.避免反复冻融B.合适的缓冲液C.低温保存D.避免光照
9.构建siRNA表达载体时需要的元件有（）
A.启动子B.终止子C.多克隆位点D.抗性基因
10.在动物实验中应用siRNA需要考虑（）
A.给药途径B.剂量C.安全性D.稳定性
答案：1.ABCD2.ABCD3.ABCD4.ABCD5.ABC6.ABC7.ABCD8.ABCD9.ABCD10.ABCD
三、判断题（每题2分，共20分）
1.siRNA只能天然存在，不能人工合成。（）
2.所有细胞对siRNA转染的敏感性相同。（）
3.siRNA作用于基因表达的转录阶段。（）
4.设计siRNA时不需要考虑其GC含量。（）
5.脂质体转染siRNA效率一定高于电穿孔。（）
6.siRNA干扰效果可以通过观察细胞形态变化来初步判断。（）
7.储存siRNA干粉时湿度对其无影响。（）
8.siRNA与mRNA完全互补配对发挥作用。（）
9.转染siRNA进入细胞后马上就能看到明显的基因沉默效果。（）
10.不同物种对siRNA的耐受性相同。（）
答案：1.×2.×3.×4.×5.×6.√7.×8.√9.×10.×
四、简答题（每题5分，共20分）
1.简述siRNA的作用机制
答案：外源或体内产生的双链RNA被Dicer酶切割成siRNA，siRNA与相关蛋白形成RNA诱导沉默复合体（RISC），RISC中的siRNA识别并与靶mRNA完全互补配对，核酸酶将靶mRNA降解，从而实现基因沉默，影响蛋白质合成。
2.设计siRNA时的主要原则
答案：选择与靶基因编码区互补的序列，避开5’和3’端非编码区；避免有回文结构和连续的A/T或G/C；GC含量在30%-50%；保证序列特异性，降低脱靶效应。
3.列举三种常用的检测siRNA干扰效果的方法及原理
答案：qRT-PCR检测靶基因mRNA水平变化；Westernblot检测靶蛋白表达量；细胞功能检测，通过细胞表型、增殖等变化判断，分别从转录、翻译和细胞水平反映干扰效果。
4.简述化学合成siRNA的优点
答案：合成灵活，可根据需求设计序列；纯度较高，杂质少；生产周期相对短；能大规模生产满足实验需求；修饰方便，可对其进行化学修饰提高稳定性和活性。
五、讨论题（每题5分，共20分）
1.讨论siRNA在疾病治疗中的潜在优势与面临的挑战
答案：优势在于可特异性沉默致病基因，副作用小；能快速设计针对不同靶点的siRNA。挑战有递送难题，难以有效进入靶细胞且保证稳定性；存在脱靶效应，可能影响其他正常基因；长期安全性和免疫原性
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