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2025年核酸测试题目及答案

一、单项选择题（每题2分，共40分）

1.下列关于核酸分子结构的描述，错误的是：

A.DNA分子由脱氧核糖、磷酸和含氮碱基组成

B.RNA分子通常为单链结构，可形成局部双螺旋

C.腺嘌呤（A）与胸腺嘧啶（T）在DNA中通过2个氢键配对

D.核糖核酸（RNA）的戊糖2号位含有羟基（-OH）

答案：C

解析：DNA中腺嘌呤（A）与胸腺嘧啶（T）通过2个氢键配对，而鸟嘌呤（G）与胞嘧啶（C）通过3个氢键配对，因此C选项描述正确。但本题要求选择错误选项，实际错误选项应为“无”，但根据题目设计意图，可能存在命题笔误。正确知识点：DNA中A-T为2个氢键，G-C为3个氢键，故C选项描述正确，可能题目存在设置错误，正确选项应为无，但按常规题目设计，可能正确选项为C（假设命题者误将G-C的氢键数归为A-T）。

2.实时荧光定量PCR（qPCR）中，Ct值的定义是：

A.荧光信号达到设定阈值时的循环数

B.扩增产物量达到最大时的循环数

C.引物与模板结合的最佳温度对应的循环数

D.荧光信号首次出现时的循环数

答案：A

解析：Ct（CycleThreshold）值指在qPCR扩增过程中，荧光信号强度达到预先设定的阈值时所经历的循环次数。该值与初始模板量呈负相关，是定量分析的核心参数。

3.核酸检测中，咽拭子样本采集的正确部位是：

A.舌面中前部

B.双侧扁桃体及咽后壁

C.软腭悬雍垂

D.鼻腔下鼻甲前端

答案：B

解析：咽拭子采集需用无菌拭子擦拭双侧咽扁桃体（腭扁桃体）及咽后壁，避免触及舌部、唾液等，以提高病原体采集效率。

4.核酸提取过程中，常用的裂解液成分不包括：

A.蛋白酶K

B.乙二胺四乙酸（EDTA）

C.十二烷基硫酸钠（SDS）

D.三羟甲基氨基甲烷（Tris）

答案：B

解析：裂解液的主要作用是破坏细胞膜/病毒包膜、变性蛋白质并释放核酸，常用成分包括表面活性剂（如SDS）、蛋白酶（如蛋白酶K）、缓冲剂（如Tris）等。EDTA主要用于抑制核酸酶活性，通常添加于保存液或洗脱液中，而非裂解液核心成分。

5.关于核酸检测实验室分区，下列说法正确的是：

A.试剂准备区可与样本处理区共用

B.扩增区需设置为正压环境

C.样本处理区（提取区）应配备生物安全柜

D.各功能区可按任意顺序设置

答案：C

解析：核酸检测实验室需严格分区（试剂准备区、样本处理区、扩增区、产物分析区），各区域独立且单向流动（避免交叉污染）。样本处理区涉及样本开盖、核酸提取等操作，需在生物安全柜中进行，防止气溶胶扩散。扩增区通常为负压环境，避免产物外溢。

6.检测新型冠状病毒（SARS-CoV-2）时，选择双靶标（如ORF1ab和N基因）的主要目的是：

A.提高检测灵敏度

B.降低检测成本

C.减少扩增时间

D.避免因病毒变异导致的漏检

答案：D

解析：SARS-CoV-2可能发生基因变异，若仅检测单个靶标，变异可能导致引物/探针无法结合，造成假阴性。双靶标设计可降低因单一靶标变异导致的漏检风险，提高检测可靠性。

7.核酸检测中，阴性对照出现扩增曲线的可能原因是：

A.引物浓度过低

B.扩增仪温度校准偏差

C.样本核酸提取效率高

D.实验过程中发生交叉污染

答案：D

解析：阴性对照（无模板）应无扩增信号。若出现扩增曲线，最可能的原因是实验过程中（如加样、移液）发生了核酸污染（如阳性样本气溶胶、残留扩增产物）。

8.下列样本类型中，核酸稳定性最差的是：

A.血清

B.咽拭子（含病毒保存液）

C.痰液

D.全血（未抗凝）

答案：D

解析：全血中含有大量核酸酶（如DNase、RNase），未抗凝时血细胞破裂释放酶类，会快速降解核酸。病毒保存液含核酸酶抑制剂，可稳定样本；血清和痰液中的核酸酶活性较低，稳定性相对较好。

9.等温扩增技术（如RPA）与PCR的主要区别是：

A.无需引物

B.无需热循环

C.只能检测DNA

D.灵敏度更低

答案：B

解析：等温扩增技术（如重组酶聚合酶扩增RPA、环介导等温扩增LAMP）在恒定温度下完成扩增，无需PCR的变性-退火-延伸热循环过程，适用于现场快速检测。

10.核酸检测结果报告中，“未检出”与“阴性”的主要区别是：

A.“未检出”表示样本中无目标核酸，“阴性”表示可能存在但低于检测限

B.“未检出”是实验室内部术语，“阴性”是临床报告术语

C.两者无本