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2025年核酸检测的测试题及答案

一、单项选择题（每题2分，共30分）

1.新型冠状病毒核酸检测中，RT-PCR技术的核心步骤是：

A.样本采集

B.逆转录（RNA→cDNA）

C.琼脂糖凝胶电泳

D.样本保存

答案：B

解析：RT-PCR（逆转录聚合酶链式反应）的核心是通过逆转录酶将病毒RNA转化为cDNA，随后进行PCR扩增，因此逆转录是关键步骤。样本采集和保存是前处理环节，电泳是传统检测方法，非RT-PCR核心。

2.核酸检测样本中，上呼吸道样本的最佳采集时间通常为：

A.发病前7天

B.发病后1-5天

C.发病后10天以上

D.退热后3天

答案：B

解析：新型冠状病毒感染后，上呼吸道（鼻咽拭子、口咽拭子）病毒载量在发病后1-5天达到高峰，此阶段采样阳性率最高；发病前或病程后期病毒载量较低，可能出现假阴性。

3.核酸检测实验室中，用于避免扩增产物污染的关键区域是：

A.样本处理区（提取区）

B.试剂准备区

C.扩增区

D.产物分析区

答案：B

解析：试剂准备区需在无核酸污染的环境中进行，所有试剂（如引物、酶、缓冲液）在此区域分装，避免扩增产物（如阳性样本的cDNA）污染试剂，是防止交叉污染的第一道防线。

4.某样本核酸检测结果显示Ct值为38（实验室设定临界值为37），正确的报告方式是：

A.阳性

B.阴性

C.灰区，需重复检测

D.无法判断

答案：C

解析：Ct值（循环阈值）越接近临界值，结果可靠性越低。当Ct值在临界值±1范围内（如36-38），需视为“灰区”，通过重复检测或更换检测试剂验证，避免因扩增效率波动导致误判。

5.核酸提取过程中，若误将样本A的提取液混入样本B的离心管，最可能导致的结果是：

A.样本A假阴性

B.样本B假阳性

C.样本A假阳性

D.样本B假阴性

答案：B

解析：样本A的提取液含病毒核酸，混入样本B后，PCR扩增时会检测到病毒核酸，导致样本B出现假阳性结果。

6.用于核酸检测的病毒保存液（如胍盐类）的主要作用是：

A.维持样本pH稳定

B.灭活病毒，保护核酸

C.促进细胞裂解

D.抑制PCR抑制剂

答案：B

解析：胍盐类保存液通过破坏病毒包膜蛋白灭活病毒（生物安全需求），同时抑制核酸酶活性，防止RNA降解，从而保护病毒核酸的完整性。

7.核酸检测实验室室内质控品的选择要求不包括：

A.与待测样本基质一致

B.涵盖阴性质控和阳性质控

C.浓度接近检测下限

D.来源于临床阳性样本

答案：D

解析：室内质控品需为人工制备的稳定材料（如重组RNA、灭活病毒），避免使用临床阳性样本（可能含其他病原体或不稳定）。基质一致、涵盖阴阳性质控、浓度接近检测下限是保证质控有效性的关键。

8.新型冠状病毒变异株（如XBB）核酸检测的靶标设计需优先选择：

A.高变异区域（如S基因）

B.保守区域（如ORF1ab、N基因）

C.宿主内参基因（如β-actin）

D.非编码区

答案：B

解析：保守区域（如ORF1ab、N基因）在病毒变异中突变率低，可保证对不同变异株的检测敏感性；高变异区域（如S基因）易因突变导致引物/探针结合失败，出现漏检。

9.核酸检测结果审核时，若某样本Ct值为30但熔解曲线异常（双峰），最可能的原因是：

A.样本中存在PCR抑制剂

B.引物二聚体或非特异性扩增

C.病毒载量过高

D.仪器温度校准偏差

答案：B

解析：熔解曲线双峰通常提示扩增产物中存在非特异性片段（如引物二聚体），与目标片段熔解温度不同；PCR抑制剂会导致Ct值升高或无扩增，病毒载量过高可能导致Ct值过低，仪器温度偏差会影响整体扩增效率。

10.核酸检测样本运输时，若采用冰袋冷藏（4℃），最长可保存时间为：

A.2小时

B.6小时

C.24小时

D.72小时

答案：C

解析：根据《新型冠状病毒核酸检测技术指南》，上呼吸道样本在4℃条件下可保存24小时，超过24小时需-70℃以下冷冻保存，避免核酸降解。

11.核酸检测实验室生物安全二级（BSL-2）的核心要求是：

A.配备正压防护服

B.实验区与办公区严格分隔

C.空气需经HEPA过滤后直排

D.所有操作在生物安全柜外进行

答案：B

解析：BSL-2实验室要求实验区与办公区物理分隔，设置独立的缓冲间；正压防护服为BSL-3及以上要求，空气需经HEPA过滤后循环或高空排放，