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2025年核酸监测相关试题及答案

一、单项选择题（每题2分，共30分）

1.核酸检测中，逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）的关键步骤不包括以下哪项？

A.病毒RNA提取

B.逆转录生成cDNA

C.引物与模板退火

D.抗原抗体结合反应

答案：D

解析：RT-PCR的核心是通过逆转录将RNA转化为cDNA，再通过PCR扩增。抗原抗体结合是免疫检测（如抗原检测）的原理，与核酸检测无关。

2.核酸检测样本采集时，口咽拭子的正确采样部位是？

A.舌尖

B.上颚

C.双侧咽扁桃体及咽后壁

D.牙龈

答案：C

解析：口咽拭子需擦拭双侧咽扁桃体及咽后壁，这些部位是病毒富集的主要区域，采样不准确会导致假阴性。

3.用于核酸检测的病毒保存液中，胍盐的主要作用是？

A.维持pH稳定

B.灭活病毒，保护核酸

C.促进细胞裂解

D.防止细菌污染

答案：B

解析：胍盐（如异硫氰酸胍）是强变性剂，可破坏病毒结构使其灭活，同时抑制RNA酶活性，防止核酸降解。

4.某实验室使用荧光定量PCR仪检测样本，Ct值为38，对照品Ct值为25（阳性阈值为35），该样本应判定为？

A.阳性

B.阴性

C.灰区需复检

D.无效

答案：B

解析：Ct值（循环阈值）与初始模板量成反比。通常阳性判定标准为Ct≤35，35Ct≤40需结合其他指标复检，Ct40一般判定为阴性。本题中样本Ct=38超过35，且无其他阳性证据，故判定为阴性。

5.核酸检测实验室的“三区两通道”中，“三区”指的是？

A.试剂准备区、样本处理区、扩增分析区

B.清洁区、半污染区、污染区

C.办公区、实验区、缓冲区

D.采样区、检测区、报告区

答案：A

解析：根据《医疗机构新型冠状病毒核酸检测工作手册（试行第二版）》，核酸检测实验室应严格分区为试剂准备区、样本处理区（含核酸提取）、扩增分析区，各区独立避免交叉污染。

6.下列哪种情况会导致核酸检测假阳性？

A.样本采集后未及时冷藏

B.扩增产物污染

C.采样拭子未接触到感染部位

D.试剂过期导致灵敏度下降

答案：B

解析：扩增产物（如PCR产物）是高浓度核酸片段，若污染实验室环境或样本，会导致非目标样本被误判为阳性（假阳性）。其他选项（A、C、D）主要导致假阴性。

7.核酸检测中，内参基因（如人RPLP0基因）的作用是？

A.验证样本中是否存在抑制剂

B.提高检测灵敏度

C.区分不同病毒亚型

D.减少实验误差

答案：A

解析：内参基因检测人源管家基因（如RPLP0），若内参Ct值异常（如无扩增或Ct值过高），提示样本采集质量差（如采样量不足）或存在PCR抑制剂（如血红蛋白、黏液），需重新采样检测。

8.新型冠状病毒（SARS-CoV-2）的核酸类型是？

A.双链DNA

B.单链正链RNA（+ssRNA）

C.单链负链RNA（-ssRNA）

D.双链RNA

答案：B

解析：冠状病毒属于套式病毒目，基因组为单链正链RNA（+ssRNA），可直接作为mRNA指导蛋白质合成。

9.核酸检测试剂的分析灵敏度（LOD）通常指？

A.试剂能检测到的最低病毒载量

B.试剂在不同样本类型中的检测能力

C.试剂对目标序列的特异性识别能力

D.试剂在多次检测中的重复性

答案：A

解析：分析灵敏度（LimitofDetection,LOD）是指试剂能可靠检测到的最低目标核酸浓度，通常以拷贝数/毫升（copies/mL）表示。

10.大规模核酸筛查中，混采检测（10:1混样）的适用条件不包括？

A.低流行地区

B.疑似病例筛查

C.常态化监测

D.无症状感染者筛查

答案：B

解析：混采检测适用于低风险、大规模筛查场景（如常态化监测、无症状人群），但疑似病例、密接等高风险人群需单采单检，避免混样导致的假阴性风险。

11.核酸检测实验室生物安全等级要求为？

A.BSL-1（一级生物安全实验室）

B.BSL-2（二级生物安全实验室）

C.BSL-3（三级生物安全实验室）

D.BSL-4（四级生物安全实验室）

答案：B

解析：新型冠状病毒属于第二类病原微生物，根据《病原微生物实验室生物安全管理条例》，其检测应在BSL-2实验室进行，涉及病毒培养时需在BSL-3实验室。

12.核酸提取过程中，磁珠法与柱提法的主要区别是？

A.磁珠法无需离心，自动化程度更高