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岩藻多糖通过调节脂代谢抑制乳腺癌小鼠肿瘤生长的研究

摘要

研究目的：

通过建立小鼠高脂乳腺癌模型，观察岩藻多糖对于小鼠乳腺癌的抑制作用，同时

结合脂质组学技术分析岩藻多糖对高脂乳腺癌小鼠脂质代谢的作用，探讨岩藻多糖抑

制乳腺癌作用机制，为岩藻多糖在乳腺癌防治中的应用提供理论依据。

研究方法：

1、46只雌性BALB/c小鼠，适应性喂养一周后，按体重随机选取13只作为空白

对照组（C组）给予普通饲料（AIN-93M）。其余33只作为高脂饮食组（Hf组），给

予高脂饲料（D12492）。持续饲喂4周，建立高脂模型。将造模成功的小鼠按体重随

机分为3组，分别为模型组（M组）、低剂量岩藻多糖组（LFu组）、高剂量岩藻多糖

组（HFu组）。将对数生长期小鼠乳腺癌（4T1）细胞悬液0.1mL注射于小鼠乳腺脂

肪垫下，建立高脂乳腺癌小鼠模型。造模成功后采用灌胃的方式分别给予LFu组、HFu

组150mg/kg和300mg/kg岩藻多糖，模型组小鼠给予等量生理盐水，持续20天。干

预期间监测小鼠一般状态、体重及肿瘤体积的变化情况。干预结束后，处死小鼠，分别

采集血液、脂肪组织、肿瘤组织样本。

2、通过生化分析仪测定血清中的脂质指标（TC，TG，LDL-C，HDL-C）的含量；

苏木精-伊红染色法（HE）观察小鼠脂肪组织的病理学改变；免疫组化染色观察PCNA

蛋白的表达情况；TUNEL染色法检测肿瘤组织细胞凋亡情况。

3、采用液相色谱-质谱（LC-MS）对小鼠血清进行脂质组学检测，筛选差异代谢物，

并对差异代谢物进行代谢通路分析。

4、免疫印迹法（Westernblot）检测凋亡蛋白Bax、Bcl-2，脂代谢蛋白FASN、SCD1、

CD36以及PI3K、AKT、P-AKT蛋白的表达水平。

结果：

1、高脂饲料喂养后，与C组相比，Hf组体重显著增加（P0.05）；小鼠血清TC、

TG、LDL-C水平升高，其差异具有统计学意义（P0.05），提示高脂小鼠模型造模成

功。

2、干预20天后，与M组相比，LFu组、HFu组肿瘤重量降低，肿瘤体积明显减

小（P0.05）；LFu组抑瘤率为32.64%，HFu组抑瘤率为44.82%。与C组相比，M组

TC、TG、LDL-C值明显升高（P0.05）；与M组相比，HFu组TC、TG、LDL-C值

明显降低（P0.05）。组织学染色结果表明，LFu组和HFu组脂肪细胞体积均减小，

其中，HFu组更趋近于正常细胞脂肪细胞水平。免疫组化结果显示，与M组相比，LFu

和HFu组PCNA阳性细胞数减少，其中HFu组PCNA阳性细胞数减少较多（P0.05）。

TUNEL染色结果显示，与M组相比，HFu组凋亡细胞数量增多（P0.05）。Western

blot实验结果显示，与M组相比，HFu组下调Bcl-2蛋白表达，同时上调Bax蛋白表

达（P0.05）。

3、血清非靶向脂质组学PCA分析结果显示，C组与M组能够明显区分，M组

和HFu组区分良好，且C组与HFu组较为接近。C组与M组之间共有差异代谢物87

个，M组与HFu组之间共有差异代谢物71个。三组间共有且存在改变的差异代谢物

有24个，包括甘油磷脂类，鞘脂类，甘油脂类。M组与HFu组之间差异代谢物主要

富集的KEGG通路有19条，影响最大的代谢通路为癌症中的胆碱代谢，其代谢图谱

显示致癌基因PI3K发生改变。

4、Westernblot实验结果显示，与C组相比，M组FASN、SCD1、CD36蛋白阳性

表达增强（P0.05），与M组相比，HFu组FASN、SCD1、CD36蛋白阳性表达减弱

（P0.05）。此外，与C组相比，M组小鼠PI3K、P-AKT蛋白的表达明显升高（P0.05）；

与M组相比，HFu组PI3K、P-AKT蛋白的表达均降低（P0.05）。

结论：

岩藻多糖具有抑制高脂乳腺癌模型小鼠肿瘤生长的作用，其作用机制可能是通过

调节小鼠脂质代谢，其中主要影响癌症中的胆碱代谢，调节PI3K/AKT信号通路来发

挥抗肿瘤作用。

硕士研