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分析与检测
ＤＯＩ：１０．１３９９５／ｊ．ｃｎｋｉ．１１－１８０２／ｔｓ．０２９０９４
引用格式：曹桦强，刘琛仪，李赛芬，等．刚果红法定量检测酵母β⁃葡聚糖的方法研究［Ｊ］．食品与发酵工业，２０２２，４８（９）：２６１－
２６６．ＣＡＯＨｕａｑｉａｎｇ，ＬＩＵＣｈｅｎｙｉ，ＬＩＳａｉｆｅｎ，ｅｔａｌ．Ｓｔｕｄｙｏｎｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｙｅａｓｔβ⁃ｇｌｕｃａｎｂｙＣｏｎｇｏｒｅｄ［Ｊ］．
ＦｏｏｄａｎｄＦｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎＩｎｄｕｓｔｒｉｅｓ，２０２２，４８（９）：２６１－２６６．
刚果红法定量检测酵母β⁃葡聚糖的方法研究
１，２１，２１，２１，２∗
曹桦强，刘琛仪，李赛芬，张彭湃
１（河南大学生命科学学院，河南开封，４７５００４）２（河南省应用微生物工程研究中心，河南开封，４７５００４）
摘要酵母β⁃葡聚糖是一种应用价值较高的多糖，因其不溶于酸碱，在测定其含量时，存在着一定的困难。刚
果红可与酵母β⁃葡聚糖发生特异性结合，用于定量检测分析。实验对刚果红检测酵母β⁃葡聚糖的反应条件及
反应体系进行优化，结果显示：在０．１ｍｏｌ／ＬｐＨ７．５的磷酸盐缓冲液中，０．２ｍｇ的刚果红溶液可与４～
１６００μｇ内的β⁃葡聚糖发生反应，产生的复合物较刚果红发生红移，在５４０ｎｍ下有最大吸收差值；最佳反应条
件为２０℃，反应１５ｍｉｎ；酵母β⁃葡聚糖含量在４～２００μｇ时，与吸光度之间有良好的线性关系，其线性回归方程
２
为：Ｙ＝０．００１１５Ｘ－０．００１１４，Ｒ＝０．９９８６；精密度试验相对标准偏差为１．１５４％；平均回收率为１００．３２％，并不
受碱溶性β⁃１，３葡聚糖的干扰，具有较高的灵敏度，可用于酵母β⁃葡聚糖的检测。
关键词酵母β⁃葡聚糖；刚果红；定量检测
酵母细胞壁来源的β⁃葡聚糖（ｙｅａｓｔβ⁃ｇｌｕｃａｎ，Ｙ提供了借鉴，但酵母β⁃葡聚糖的不溶性，却妨碍了该
β⁃Ｇｌｕ）分为碱溶性和碱不溶性，碱不溶性酵母β⁃葡［１２］
方法的直接应用。王志等利用二甲亚砜（ｄｉｍｅｔｈｙｌ
［１］［２］［３］
聚糖具有抗肿瘤、抗氧化、改善肠道菌群、提ｓｕｌｆｏｘｉｄｅ，ＤＭＳＯ）作为酵母β⁃葡聚糖的助溶剂，实现
高人体免疫力等作用，在疾病的预防、治疗方面有着了酵母β⁃葡聚糖溶解，刚果红试剂得以用于酵母β⁃
潜在的应用价值。酵母β⁃葡聚糖也是一种大分子物葡聚糖检测，并建立了相应的检测体系。但是该方法
质，具有β⁃１，３键构成的主链，以及β⁃１，６键形成的没有对检测的特异性进行研究，不能排除酵母细胞壁
［４］
分支，并具有独特的三螺旋空间结构，不溶于水、中碱溶性β⁃１，３葡聚糖的干扰，该文报道的可完全溶
酸、碱。解β⁃葡聚糖的最低ＤＭＳＯ浓度，也与我们的研究结
刚果红（Ｃｏｎｇｏｒｅｄ，ＣＲ）是一种阴离子偶氮染料，果有较大差异。此外缓冲液的选择、检测限等也没有
棕红色、粉状，易溶于水，具有联苯偶氮结构，能与酵明确说明，影响了其实验的重现性。所以在此基础之
［５］
母β⁃葡聚糖三螺旋结构发生特异性结合。有研究
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