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基因工程课后习题答案试卷及答案

考试时间：______分钟总分：______分姓名：______

一、选择题（每题2分，共20分。请将正确选项的代表字母填在题干后的括号内）

1.下列哪一种酶是基因工程中常用的工具，能够识别并切割DNA的特定位点？

A.DNA聚合酶

B.RNA聚合酶

C.限制性内切酶

D.DNA连接酶

2.在基因克隆过程中，将目的基因片段与载体DNA连接后，需要使用哪种酶来催化磷酸二酯键的形成？

A.限制性内切酶

B.DNA聚合酶

C.DNA连接酶

D.限制性内切酶和DNA连接酶

3.质粒作为基因工程中最常用的载体，其必须具备的要素不包括：

A.能够自我复制

B.具有选择标记基因

C.具有较大的DNA片段容量

D.必须是原核生物的染色体

4.PCR（聚合酶链式反应）技术能够特异性扩增目的DNA片段，这主要依赖于：

A.DNA连接酶的作用

B.限制性内切酶的作用

C.特异性引物和高温变性条件

D.载体的复制能力

5.将外源DNA片段导入宿主细胞（如细菌）的过程称为：

A.基因测序

B.基因克隆

C.基因表达

D.基因转化

6.限制性内切酶识别的DNA序列通常是：

A.任意序列

B.随机序列

C.特定的回文序列

D.载体上的选择标记基因

7.下列哪一项不属于基因工程的应用领域？

A.生产治疗性蛋白质药物

B.育种抗虫棉花

C.制作基因探针进行疾病诊断

D.改造微生物用于环境净化

8.基因治疗的主要目标是：

A.提高农作物产量

B.使生物体产生新的抗性

C.治疗或预防遗传性疾病

D.制造转基因食品

9.DNA连接反应通常需要在缓冲液中进行，该缓冲液需要提供哪种离子来维持反应的pH稳定？

A.钠离子（Na+）

B.镁离子（Mg2+）

C.钙离子（Ca2+）

D.钾离子（K+）

10.下列哪项技术利用了限制性内切酶和DNA连接酶？

A.基因测序

B.DNA指纹分析

C.PCR扩增

D.基因克隆

二、填空题（每空1分，共15分）

1.基因工程又称为，其核心是DNA重组技术。

2.限制性内切酶识别并切割DNA分子，产生的粘性末端具有互补的碱基序列，这有利于DNA片段的。

3.载体通常需要具备自我复制能力、携带选择标记基因以及足够的来插入外源DNA片段。

4.PCR技术需要用到四种脱氧核苷酸（dNTPs）、一对引物、和DNA聚合酶。

5.将目的基因导入植物细胞常用的方法是和农杆菌介导转化法。

6.基因诊断是利用特异性分子探针来检测生物体内的技术。

7.基因治疗是指将导入靶细胞，以纠正或治疗遗传性疾病等疾病的方法。

三、简答题（每题5分，共15分）

1.简述利用限制性内切酶和DNA连接酶进行基因克隆的基本步骤。

2.简述PCR技术的基本原理及其主要步骤。

3.简述基因工程可能带来的伦理问题之一，并谈谈你的看法。

四、论述题（10分）

假设你想利用基因工程培育一种能够抵抗某种病害的番茄。请简述你需要采取的主要步骤，并说明每一步骤中可能遇到的技术难点或关键点。

试卷答案

一、选择题

1.C

2.C

3.D

4.C

5.D

6.C

7.A

8.C

9.B

10.D

二、填空题

1.分子克隆工程

2.连接

3.复制；容量

4.温控循环仪（或热循环仪）

5.基因枪法

6.特异基因片段（或目的基因）

7.外源基因（或基因片段）

三、简答题

1.解析思路：考察对基因克隆核心步骤的掌握。需要依次写出获取目的基因、获取载体、限制性酶切、连接、转化、筛选和鉴定等关键环节。每个环节都要点明使用的主要工具或方法。

答案要点：(1)获取目的基因（如通过PCR扩增或限制性内切酶切割）；(2)选择合适的载体（如质粒）并获取同样用限制性内切酶切割的线性DNA片段；(3)利用DNA连接酶将目的基因片段与载体连接成重组DNA分子；(4)将重组DNA分子导入宿主细胞（如大肠杆菌）进行转化；(5)利用选择标记（如抗生素抗性）筛选出成功导入重组体的宿主细胞；(6)对筛选出的阳性克隆进行鉴定（如通过抗生素抗性测试、PCR检测、限制性酶切分析、测序等）。

2.解析思路：考察对PCR原理和