病毒感染的检查方法与防治原则.pptVIP

*第30页，共53页，星期日，2025年，2月5日(2)免疫标记法（FIA、EIA/ELISA、RIA）——多种病毒鉴定(3)凝胶免疫扩散试验(gelimmuno-diffusiontest)——多种病毒鉴定3.病毒血清学鉴定*第31页，共53页，星期日，2025年，2月5日4.病毒分子生物学鉴定抗原变异病毒基因的鉴定核酸扩增核酸杂交基因芯片基因测序*第32页，共53页，星期日，2025年，2月5日（三）病毒数量与感染性测定1.血凝试验：病毒总量（活病毒＋死病毒）2.蚀斑形成试验（plaqueformationtest）3.50％组织细胞感染量（50％tissuecultureinfectiousdose,TCID50）感染性病毒量(PFU)*第33页，共53页，星期日，2025年，2月5日*第34页，共53页，星期日，2025年，2月5日CalculateTCID50.Formula:TCID50/100ul=[(%positivevalue50%)?50%]/[(%positivevalue50%)?(%positivevalue50%)]*logDilutionfactor#?+(logdilution50%)?#：10-folddilution,itis1.*第35页，共53页，星期日，2025年，2月5日(四)新病毒的鉴定核酸类型的测定(PCR)理化性状的检测（如对干、热、酸、脂溶剂的敏感性等）形态学鉴定（电镜）血清学鉴定（中和试验）基因测序和生物对比（序列同源性分析）*第36页，共53页，星期日，2025年，2月5日三、病毒感染的血清学诊断应用于：①采取标本分离病毒为时已晚②目前尚无分离此病毒的方法或难以分离的病毒③为证实所分离的病毒的临床意义④进行血清流行病学调查等*第37页，共53页，星期日，2025年，2月5日1.中和试验（neutralizingtest）病毒＋中和抗体病毒失去感染性特点：特异性高，抗体维持时间长应用：人群免疫情况的调查临床诊断少用*第38页，共53页，星期日，2025年，2月5日**病毒感染的检查方法与防治原则*第1页，共53页，星期日，2025年，2月5日病原学诊断的意义有助于临床治疗（抗生素、干扰素等）为控制病毒学疾病的流行提供实验依据（疫苗等）*第2页，共53页，星期日，2025年，2月5日第一节病毒感染的检查*第3页，共53页，星期日，2025年，2月5日病毒感染的检查检测内容查病毒查特异性抗体病毒颗粒病毒抗原（如血凝素）病毒核酸（PCR）病毒酶类：如逆转录酶电镜直接观察光镜检查包涵体分离培养（如IgM、IgG）*第4页，共53页，星期日，2025年，2月5日一、标本的采集与送检原则基本与细菌相似，但应注意：1.标本用“双抗”（2000-10000U）或两性霉素B（2ug/ml)处理2.低温保存，尽快送检（冰块，CO2）3.血清学诊断采双份血清（发病初，2-3周）*第5页，共53页，星期日，2025年，2月5日二、病毒的分离与鉴定（一）病毒的分离培养细胞培养（cellculture）鸡胚接种（egginoculation）动物接种（animalinoculation）*第6页，共53页，星期日，2025年，2月5日二、病毒的分离与鉴定一般程序：标本无菌处理动物接种鸡胚培养细胞培养指标阳性指标阴性病毒鉴定盲传2～3代指标阴性病毒阴性*第7页，共53页，星期日，2025年，2月5日（一）病毒的分离培养1.细胞培养（简述）单层细胞培养（monolayercellculture）分类悬浮细胞培养（suspendedcellculture）原代细胞（primarycell）细胞种类二倍体细胞（diploidcell）传代细胞系（continuouscellline）*第8页，共53页，星期日，2025年，2月5日病毒的细胞培养细胞培养瓶单层细胞