脲酶活性的测定.ppt

脲酶测定●DepartmentofAnimalscience动物营养与饲料学脲酶活性的测定第1页，共12页，星期日，2025年，2月5日一、实验目的1、掌握大豆制品中脲酶活性的测定原理2、熟悉掌握用PH增值法测定大豆制品中脲酶活性第2页，共12页，星期日，2025年，2月5日二、测定原理将粉碎的大豆制品与中性尿素缓冲溶液混合，在30℃保持30分钟，尿素酶催化尿素水解产生氨，由于尿素水解释放的氨是碱性的，可使溶液PH值升高，试样溶液与空白溶液的PH值之差，即可间接表示出氨量的多少。NH2CONH2+尿素酶2NH3↑+CO2第3页，共12页，星期日，2025年，2月5日三、仪器及试剂1、仪器分析天平、样品粉碎机、样品分析筛、恒温水浴、酸度计、称量瓶、移液管、角匙等第4页，共12页，星期日，2025年，2月5日0.05mol/L磷酸盐缓冲液、尿素缓冲溶液等2、试剂四、试样的选取和制备选取具有代表性的试样，粉碎至40目，用“四分法”缩减至200～300g，密闭保存，以防试样组分变化或变质。第5页，共12页，星期日，2025年，2月5日五、测定步骤1、样品试验：准确称取0.200±0.001g样品于称量瓶中，加入10ml尿素缓冲溶液，加塞混合，然后置于30℃水浴中，在混合操作时称量瓶切勿倒置。第6页，共12页，星期日，2025年，2月5日2、空白试验：准确称取0.200±0.001g样品于称量瓶中，加入10ml0.05mol/L磷酸盐缓冲溶液，加塞混合，置于30℃水浴中。3、样品试验与空白试验的制备应相隔5分钟，并且每隔5分钟搅拌内容物一次。第7页，共12页，星期日，2025年，2月5日4、30分钟后，相隔5分钟将样品与空白试验的称量瓶从水浴中取出，将上层液体移入5ml烧杯中，在从水浴中取出刚达5分钟时，分别测定此种上层液体的PH值。第8页，共12页，星期日，2025年，2月5日1、计算公式：六、结果的计算样品试验的PH值与空白试验的PH值两者之间的差异，则为脲酶活性的指数，即：脲酶活性=试样的PH测定值-空白的PH测定值第9页，共12页，星期日，2025年，2月5日脲酶测定●DepartmentofAnimalscience动物营养与饲料学