第18章 色谱法导论.pptVIP

第18章色谱法导论第1页，共33页，星期日，2025年，2月5日高效液相色谱仪气相色谱仪*第2页，共33页，星期日，2025年，2月5日色谱图*第3页，共33页，星期日，2025年，2月5日教学内容?1.色谱分离的基本原理和基本概念

2.色谱分离的理论基础

3.色谱定性和定量分析的方法(下一章讲授)重点与难点?1.塔板理论，包括流出曲线方程、理论塔板数(n)及有效理论塔板数(neff)和塔板高度(H)及有效塔板高度(Heff)的计算

2.速率理论方程

3.分离度和基本分离方程*第4页，共33页，星期日，2025年，2月5日学习目标?1.熟练掌握色谱分离方法的原理

2.掌握色谱流出曲线（色谱峰）所代表的各种技术参数的准确含义

3.能够利用塔板理论和速率理论方程判断影响色谱分离的各种实验因素

4.学会各种定性和定量的分析方法。*第5页，共33页，星期日，2025年，2月5日色谱法的起源、发展及定义碳酸钙菊根粉石油醚样品*第6页，共33页，星期日，2025年，2月5日色谱法是一种分离技术试样混合物的分离过程也就是试样中各组分在色谱分离柱中的两相间不断进行的分配过程。其中的一相固定不动，称为固定相;另一相是携带试样混合物流过此固定相的流体（气体或液体），称为流动相。*第7页，共33页，星期日，2025年，2月5日当流动相中携带的混合物流经固定相时，其与固定相发生相互作用。由于混合物中各组分在性质和结构上的差异，与固定相之间产生的作用力的大小、强弱不同，随着流动相的移动，混合物在两相间经过反复多次的分配平衡，使得各组分被固定相保留的时间不同，从而按一定次序由固定相中流出。*第8页，共33页，星期日，2025年，2月5日微观分离过程*第9页，共33页，星期日，2025年，2月5日色谱法分类1．按两相状态分类2、按分离机理分类3、按固定相的形态分类*第10页，共33页，星期日，2025年，2月5日两相状态两相状态流动相的物态液相色谱（LC）气相色谱（GC）液－固色谱液－液色谱气－固色谱气－液色谱超临界流体色谱（SFC）*第11页，共33页，星期日，2025年，2月5日分离机理分离机理吸附色谱——吸附能力强弱不同分配色谱——溶解度不同离子交换色谱——离子交换剂上的亲和力不同凝胶渗透色谱——在多孔固定相中的选择渗透亲和色谱*第12页，共33页，星期日，2025年，2月5日固定相的形态固定相装于柱内的色谱法，称为柱色谱。固定相呈平板（面）状的色谱法，称为平板（面）色谱，它又可分为薄层色谱和纸色谱。固定相形态柱色谱纸色谱薄层色谱*第13页，共33页，星期日，2025年，2月5日色谱流出曲线及有关术语色谱图是以组分的浓度变化作为纵坐标，流出时间作为横坐标的。这种曲线称为色谱流出曲线。*第14页，共33页，星期日，2025年，2月5日基线——操作条件稳定后，仅有流动相通过检测器时，仪器检测到的信号称为基线。基线*第15页，共33页，星期日，2025年，2月5日峰高——色谱峰顶点与基线之间的垂直距离称为色谱峰高；峰高AB’*第16页，共33页，星期日，2025年，2月5日色谱峰区域宽度（反映色谱柱或所选色谱条件的好坏）1.标准偏差σ：即0.607倍峰高处色谱峰宽度的一半；σEF的一半2.半峰宽：即峰高一半的宽度；半峰宽GH3.峰底宽度：色谱峰两边的拐点作切线，与基线交点间的距离IJ峰底宽度*第17页，共33页，星期日，2025年，2月5日保留值——试样各组分，即溶质在色谱柱或色谱体系中保留行为的度量，反映溶质与色谱固定相作用力类型和大小，与两者分子结构有关，是重要的色谱热力学参数和色谱定性依据。保留值保留时间保留体积死时间保留时间调整保留时间死体积保留体积调整保留体积相对保留值*第18页，共33页，星期日，2025年，2月5日死时间——流动相流经色谱柱的平均时间定义为死时间，以tM表示tM=L/uＬ－柱长u－流动相线速度死时间OA’*第19页，共33页，星期日，2025年，2月5日保留时间——溶质通过色谱柱的时间，即从进样到柱后洗出最大浓度的时间tR表示tR=L/uxＬ－柱长ux－溶质通过色谱柱的平均线速度保留时间OＢ*第20页，共33页，星期日，2025年，2月5日调整保留时