第五章毛细管电泳.pptVIP

CE检测器的检测限及其特点第62页，共103页，星期日，2025年，2月5日毛细管区带电泳第63页，共103页，星期日，2025年，2月5日毛细管区带电泳---分离原理?样品在电解液中泳动,根据物质的荷/质比（charge/mass比值）差异来进行分离，比值愈大,跑得愈快。第64页，共103页，星期日，2025年，2月5日第65页，共103页，星期日，2025年，2月5日第66页，共103页，星期日，2025年，2月5日CapillaryZoneElectrophoresis

第67页，共103页，星期日，2025年，2月5日毛细管区带电泳---分离原理第68页，共103页，星期日，2025年，2月5日毛细管区带电泳---分离原理?特点?可使用凃层或未凃层的毛细管?避免样品吸附?抑制电渗透流?毛细管中除电解质外,无需填充任何物质?使用未凃层的毛细管进行分离时,不仅是正电荷，包括无电荷及负电荷物质都會向负电极移动(因为电渗流),所以可同时检测正电荷、负电荷及中性物质?以电解质之pH值、离子浓度、温度、毛细管电泳及电压大小来控制分离状态第69页，共103页，星期日，2025年，2月5日毛细管区带电泳---分离原理?主要应用蛋白质、多肽及帶电荷的大小分子?可取代传统电泳及离子交换HPLC第70页，共103页，星期日，2025年，2月5日胶束电动毛细管电泳第71页，共103页，星期日，2025年，2月5日胶束电动毛细管电泳---分离设想?电解质中加入表面活性剂,使之形成胶束，样品根据疏水性的强弱的差异，在胶束与电解质的分配系数有所不同,來进行分离?样品疏水性愈強,则进入胶束的机会愈大?通常物质进入胶束后,泳动的速度会变慢,因此疏水性愈強的物质則愈慢出來第72页，共103页，星期日，2025年，2月5日胶束电动毛细管电泳---特点及主要应用?根据分子之疏水性及亲水性的強弱差异进行分离?可分离不帶电荷的物质,疏水性強的物质或电荷/质量比值相近之物质?对样品分子大小有限制，要求分子量小于5000（CZE则没有此限制）?药物分析、环境污染物分析及其他小分子物质?可取代反相HPLC第73页，共103页，星期日，2025年，2月5日毛细管电泳中的zeta电势第二种：荷电粒子表面上的zeta电势在电介质中，任何带电粒子都可以被看成是一个偶电层系统的一部分。在这个系统中，粒子自身的电荷被异号的带电离子中和，这些异号离子中有一些被不可逆地吸附到粒子上，而另一些则游离在附近，并扩散到电介质中进行离子交换。“固定”离子有一个切平面，它和离得最近的游离离子间的电势称为粒子的zeta电势。第30页，共103页，星期日，2025年，2月5日电泳在半导体中，荷电粒子在外电场作用下的泳动现象称为电泳（electrophoresis）.带电粒子在电场中受到向前的力FF=q×E同时，带电粒子受到粘滞阻力F’F’=f×u当F=F’，粒子以稳态速度运动，有：u’=qE/f对于球形粒子，f由stokes定律给出，f=6??×r,有：第31页，共103页，星期日，2025年，2月5日电泳（续）根据上式，电泳速度是和外加电场有关，所以电泳中常用淌度（mobility,?）来描述荷电粒子的电泳行为和特性.

电泳淌度（?ep）：单位场强下离子的平均电泳速度

影响荷电粒子在电场中的迁移速度的因素有：

电场强度、介质性质、

粒子的荷电情况、粒子的大小和形状第32页，共103页，星期日，2025年，2月5日电渗（electroosmoticflow,EOF）电渗流是一种液体相对于带电的管壁移动的现象。在毛细管电泳里在所指的电渗是：在高电压下，溶液中的正电荷与毛细管管壁表面的负电荷之间作用，引起流体朝负极方向运动的现象。和电泳淌度相似，电渗淌度（?eo）可表示为：第33页，共103页，星期日，2025年，2月5日在普通的毛细管区带电泳条件下，电渗流从阳极流向阴极，大小受到Zeta电势、偶电层厚度、介质粘度的影响，一般电势愈大、偶电层愈薄、粘度愈小，电渗流值就愈大。