南农传染病实习报告.docVIP

实习报告

学院:

动物医学院

课程:

传染病学实习

班级:

动医09X班

学号:

1XX09XXX

姓名:

大猪妖

指导教师:

王先炜职称:副教授

实习时间

2013年5月27日至2013年6月1日

实习地点

逸夫楼4017

2013年6月9日

南京农业大学教务处制

实习报告

一、实习目的

以副猪嗜血杆菌病和蓝耳病为模型，学习传染病的临床诊断、猪体剖检的方法，结合病理变化，对患病猪进行初步诊断；

通过对感染猪体内病毒和细菌的分离鉴定，学习掌握细菌性猪病、病毒性猪病的实验室诊断方法。

掌握畜禽传染病的临床诊断技术。

掌握畜禽传染病实验室诊断方案的设计、诊断试剂的准备和检测结果分析判定。

掌握畜禽细菌与病毒混合感染的病原分离与鉴定技术。

掌握细菌药敏试验指导畜禽临床用药。

实习安排

时间

地点

内容

周一

5月27日

白天

逸夫楼4017

诊断试剂的配制；

器皿的准备以及灭菌的处理

周二

5月28日

白天

逸夫楼4017

病猪的临床诊断；

病料的采取与处理；

细菌的涂片检查与分离培养

周三

5月29日

白天

逸夫楼4017

病毒的分离接种（病料过滤和接种细胞）；分离细菌镜检和增殖

周四

5月30日

晚上

逸夫楼4017

细菌的生化试验、药敏试验和细菌鉴定；

观察接种细胞

周五

5月31日

江浦农场

参观学习

周六

6月1日

下午

逸夫楼4017

病毒细胞病变观察、菌落鉴定

实习内容

第一天：王先炜老师讲解本周传染病学实习的主要内容，传染病临床诊断的主要方法，实验器材的准备，实习过程中的注意事项以及实习分组安排，将第一大组所有同学再分为三大组，9小组。

准备实验器材，配制试剂

准备实验器材，配制试剂

观察动物发病情况

观察动物发病情况

检测病毒检测细菌

检测病毒

检测细菌

病料匀浆反复冻融

病料匀浆反复冻融

平板划线分离、肉汤接种

平板划线分离、肉汤接种

细胞接种纯培养药敏实验

细胞接种

纯培养

药敏实验

生化试验

生化试验

病毒的初步鉴定细胞病变观察

病毒的初步鉴定

细胞病变观察

实验准备

（一）灭菌消毒用品：手术刀片、手术刀柄、剪刀、大镊子、小镊子、剪刀、

黄色枪头一盒、用锡箔纸包好小滤器（一组3至5个）、玻璃匀浆器、1.5mL离心管、PCR管。

（二）其他用品：解剖盘、酒精灯、酒精棉球、解剖刀、记号笔、注射器、染色缸、乳胶手套、接种环、载玻片、细菌涂布棒、倒置显微镜等。

试剂及配制

TSA平板：每个组2—3块，全部9组一起配，按10组量配置，高压后然后分装。

每块TSA平板的成分：

TSA 2g

去离子水 50mL

121℃，15-20min，冷却至50℃左右，加入1.25mL的小牛血清，0.625mLNAD

TSB液体培养基成分：全部小组依旧一起配制，高压后然后分装，

每管液体培养基的成分：

蛋白胨 0.04g

蛋白示 0.04g

酵母提取物 0.05g

TSB 0.25g

去离子水 0.01L

混匀后可分装小试管内（每管3mL）121℃，15-20min

用之前每只试管加1μL血清，1μLNAD

血清：用前要灭能（56℃，40min）

生理盐水：0.45gNaCI加入50mL去离子水，然后高压灭菌

细胞维持液：在50ml的DMEM液中加入1ml的血清和1ml的双抗（青、链霉素）；

（四）倒TSA平板

将TSA溶液高压后冷却至60℃左右，加入1.25mL的小牛血清，0.625mLNAD。然后将平板边沿用酒精灯外焰烧一下后，将TSA倒入平板中，铺满。标记好班级，组号，名称和时间

第二天：猪体剖解、细菌学检查和病毒学检查病料取样。王老师给每一大组安排了一位研究生给我们及时的指导。

（一）外部检查

观察被毛和营养状况，检查四肢、眼结膜的颜色、皮肤等有无异常，下颌淋巴结是否有肿胀现象，肛门附近有无粪便污染等。

触诊：下颌淋巴结，腹股沟淋巴结，髂下淋巴结

宰杀，固定和剖腹检查

宰杀：劲动脉放血致死。因为猪对麻醉药不敏感，故不使用麻药，直接放血致死。

固定：猪体取背卧位，先切断肩胛骨内侧和髋关节周围的肌肉（以部分皮肤与躯体相连），将四肢向外摊开，以保持尸体仰卧位置。

腹腔剖开

从剑状软骨后方沿腹壁正中线由前向后至耻骨联合切开腹壁，再从剑状软骨沿左右两侧肋骨后缘切开至腰椎横