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一、物理参数温度(℃)是指整个发酵过程或不同阶段中所维持的温度。它的高低与发酵过程中酶反应速率、氧在培养液中的溶解度和传递速率、菌体生长速率和产物合成速率等有密切关系。压力(Pa)发酵过程中发酵罐维持的压力。罐内维持正压可以防止外界空气中的杂菌侵在培养液中的溶解度有关,间入,以保证纯种的培养。同时罐压的高低还与氧和在培养液中的溶解度有关,间接影响菌体的代谢。搅拌转速(r/min)是指搅拌器在发酵过程中的转动速度,通常以每分钟的转数来表示。它的大小与氧在发酵液中的传递速率和发酵液的均匀性有关。第30页,共50页,星期日,2025年,2月5日搅拌功率(kW)是指搅拌器搅拌时所消耗的功率,常指每立方米发酵液所消耗的功率(它的大小与液相体积氧传递系数有关。空气流量(V/V.min)是指每分钟内每单位体积发酵液通入空气的体积,它是需氧发酵中重要的控制参数之一。它的大小与氧的传递和其他控制参数有关。一般控制在范围内。粘度(Pa.s)粘度大小可以作为细胞生长或细胞形态的一项标志,也能反映发酵罐中菌丝分裂过程的情况。通常用表观粘度表示。它的大小可影响氧传递的阻力,也可反映相对菌体浓度。第31页,共50页,星期日,2025年,2月5日目前发酵过程主要分析项目如下1、pHpH与微生物的生命活动密切相关——酶催化活性pH的变化又是微生物代谢状况的综合反映——基质代谢、产物合成、细胞状态、营养状况、供氧状况二、化学参数第32页,共50页,星期日,2025年,2月5日2、排气氧、排气CO2和呼吸熵排气氧的浓度表征了进气的氧被微生物利用以后还剩余的氧,因此排气氧的大小反映了菌生长的活性,通过计算可以求得摄氧率(OUR)。排气二氧化碳反映了微生物代谢的情况,因为微生物摄入的氧并不是全部变成二氧化碳的,有的进入代谢中间物分子,进入细胞或产物,因此消耗的氧并不等于排出的二氧化碳,此外,含氧的有机物降解后会产生二氧化碳,使排气二氧化碳大于消耗的氧。第33页,共50页,星期日,2025年,2月5日RQ值随微生物菌种的不同,培养基成分的不同,生长阶段的不同而不同。测定RQ值一方面可以了解微生物代谢的状况,另一方面也可以指导补料CER表示单位体积发酵液单位时间内释放的二氧化碳的量呼吸熵=呼吸熵反映了氧的利用状况发酵过程的代谢控制第34页,共50页,星期日,2025年,2月5日一般在发酵中后期为保证产生次级代谢产物,有意使菌体处于半饥饿状态,在营养限制的条件下,维持产生次级代谢产物的速率在较高水平。对于这种工艺,后期的补料控制是关键。过程中发现,在补糖开始时,不但CER、OUR大幅度提高,连RQ也提高约10%,表明通过补糖不但提供了更多的碳源,而且随着体系内葡萄糖浓度提高,糖代谢相关酶活力也提高,产能增加。发酵过程的代谢控制第35页,共50页,星期日,2025年,2月5日3、糖含量微生物生长和产物合成与糖代谢有密切关系。糖的消耗反映产生菌的生长繁殖情况反映产物合成的活力菌体生长旺盛糖耗一定快,残糖也就降低得快通过糖含量的测定,可以控制菌体生长速率,可控制补糖来调节pH,促进产物合成,不致于盲目补糖,造成发酵不正常。糖含量测定包括总糖和还原糖。总糖指发酵液中残留的各种糖的总量。如发酵中的淀粉、饴糖、单糖等各种糖。还原糖指含有自由醛基的单糖,通常指的是葡萄糖。发酵过程的代谢控制第36页,共50页,星期日,2025年,2月5日4、氨基氮和氨氮氨基氮指有机氮中的氮(NH2-N),单位是mg/100ml。如氨基酸中的氮,黄豆饼粉、花生饼粉中都有有机氮。氨氮指无机氨中的氮(NH3-N)。氮利用快慢可分析出菌体生长情况,含氮产物合成情况。但是氮源太多会促使菌体大量生长。有些产物合成受到过量铵离子的抑制,因此必须控制适量的氮。通过氨基氮和氨氮的分析可控制发酵过程,适时采取补氨措施。发酵后期氨基氮回升,这时就要放罐,否则影响提取过程。发酵过程的代谢控制第37页,共50页,星期日,2025年,2月5日第1页,共50页,星期日,2025年,2月5日第2页,共50页,星期日,2025年,2月5日第3页,共50页,星期日,2025年,2月5日有一个好的菌种以后要有一个配合菌种生长的最佳条件,使菌种的潜能发挥出来。目标是得到最大的比生产速率和最大的生产率。发酵过程工艺控制的目的第4页,共50页,星期日,2025年,2月5日发酵过程受到多因素又相互交叉的影响如菌本身的遗传特性、物质运输、能量平衡、工程因素、环境因素等等。因
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