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《仪器分析技术》课程-微教材
微课编号
W6202
微课名称
高效液相色谱仪常见检测器分类及工作原理和应用
所属模块
高效液相色谱分析技术
子模块
高效液相色谱仪的基本结构及使用
关键词
检测器、分类、工作原理、应用
是否通用
√通用农产品食品
是否重点建设
√是否
微课类型
理论
微课形式
PPT
教学设计模式
讲授法
教学目标
使观看者了解高效液相色谱仪常见检测器的分类及工作原理
教学内容
知识点
技能点
1.常见检测器的类型
2.检测器的分类
3.检测器的工作原理
4.检测器的应用
能根据检测的样品和方法判定选用何种检测器
知识讲解
检测器是是高效液相色谱仪的核心部分，它负责把从色谱柱分离出来的各组分快速、准确的检测出来，实现定性、定量分析。目前已有几十种检测器，其中仪器上常见的有六种：
1、紫外-吸收检测器（UA）
2、光电二极管阵列检测器（PDA）
3、荧光检测器（FD）
4、示差折光检测器（RID）
5、蒸发光散射检测器（ELSD）
6、纳克级激光计数检测器（NQAD）
一、检测器的分类
目前有两种基本类型的检测器：
1．溶质型检测器
它仅对被分离组分的物理胡化学特性有响应，属于这类检测器的有紫外、荧光、电化学检测器。
2．总体检测器
它对试样和洗脱液总的物理或化学性质有响应，属于这类检测器的有示差折光、蒸发光散射、电导检测器等。
二、常用的检测器工作原理及应用
（一）紫外-可见吸收检测器（ultraviolet-visibledetector，UA）
紫外可见吸收检测器是HPLC分析中最常见的检测器，几乎所有的液相色谱仪都配有这种检测器。
凡是具有紫外吸收的物质均可以使用其进行检测。
1．检测原理
依据被分析试样组分对待定波长紫外光的选择吸收性，组分浓度与吸光率的关系遵守比尔定律。
2．检测过程
透镜将光源射来的光束变成平行光，经过遮光板变成一对细小的平行光束，分别通过测量池与参比池，然后用紫外滤片滤掉非单色光，通过双紫外光敏电阻，根据输出信号差进行检测
3．特点
（1）优点：灵敏度高，检测下限约为μg/ml；线性范围广；对温度和流速不敏感，适用于进行梯度洗脱。
（2）局限：选择性检测器，仅适用于测定有紫外吸收的物质。
（二）光电二极管阵列检测器（photodiodearraydetector,PDA）
采用光电二极管阵列作为检测元件，构成多通道并行工作，是一种光学多通道检测器。
1．检测原理
检测器的接收是由一组光电二极管（数量由35～1024个不等）接收，并转换为电信号。光电二极管的排列（数字分辨）和狭缝宽度（光学分析）决定了检测器的全波长分析能力
阵列式接收器上的光信号快速扫描采集数据，得到吸收值（A）是保留时间（tR)和波长函数的三维色谱光谱图
2．特点
具有紫外吸收的物质均可以使用其检测。
优点：灵敏度高，噪音低，线性范围宽；是一种三维水平的吸光度检测器-采集三维谱图；
可提供许多有用的功能：如色谱峰纯度鉴定；可以发现单波长检测时未测到的峰；任意波长的色谱再处理。
（三）荧光检测器（fluorescencedetector,FD）
是一种高灵敏度、有选择性的检测器，可检测能产生荧光的物质，某些不发光的物质也可通过化学衍生化生成荧光衍生物，再进行荧光检测，适用于痕量分析。
1．检测原理
发荧光的化合物吸收光使其分子达到激发态，当其返回到基态时发射光的现象即荧光。
2．检测过程
由光源发出的光，经激发光单色器后，得到所需波长的激发光。经过样品池被样品吸收，并使其被激发后发射出荧光。再经选择发射波长的单色器分光后，单一波长的发射光波被送至检测器进行检测，吸光强度与激发光强度成正比。
3．特点
优点：1）灵敏度高，10-12g/ml级检测
2）受流速温度变化影响较小
局限：1）不是所有化合物都有荧光，必要时需要衍生
2）线性范围窄
4．应用
可检测能产生荧光的物质，某些不发光的物质也可通过化学衍生化生成荧光衍生物，再进行荧光检测，适用于痕量分析，在药物和生化分析中有广泛的应用。
（四）示差折光检测器（differentialrefractiveIndexdetector，简称RID）
是浓度型通用检测器，对所有溶质都有响应，某些不能用选择性检测器检测的组分，如高分子化合物、糖类、脂肪烷烃等均可用示差检测器检测。
1．检测原理
基于连续测定流通池中溶液折射率来测定试样各组分浓度。
光从一种介质进入另一种介质时，由于两种物质的折射率不同就会产生折射。只要样品组分与流动相折光系数不同，就可被检测，两者相差越大，灵敏度越高。在一定范围内，检测器的输出与溶质浓度成正比。
2．特点
通用型检测器。
局限：1）对温度压力变化敏感；
2）布恩
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