化学发光分析法.pptVIP

第22页，共50页，星期日，2025年，2月5日过氧化草酸酯的化学发光反应体系（1）草酸酯-过氧化氢-蒽类衍生物体系：迄今发现的效率最高的非生物化学发光反应体系。由于蒽类衍生物的脂溶性较强，所以反应体系的溶液中通常会加入一定量的有机溶剂或表面活性剂。蒽的衍生物:9,102二苯基蒽,9,102二苯乙炔基蒽[5,6]及其取代衍生物[7～9]等。除此之外,还有萘[10]和聚酰亚胺[11,12]的取代衍生物。

第23页，共50页，星期日，2025年，2月5日（2）草酸酯-H2O2体系：主要用于测定那些酶反应产物为H2O2的酶底物，如葡萄糖、氨基酸等。改变H2O2用量，对体系发光强度影响不大，由于H2O2具有易分解性质，一般H2O2用量为草酸酯3~4倍。第24页，共50页，星期日，2025年，2月5日（3）草酸酯-过氧化氢-荧光待测物体系：用于测定某些具有荧光或其衍生物具有荧光的组分进行分析测定，如环孢素A、儿茶酚胺、类固醇、地塞米松等。第25页，共50页，星期日，2025年，2月5日酸性高锰酸钾具有很强的氧化能力，可以与多种无机物和有机物进行氧化还原反应，但由于其反应的发光强度较弱，所以知道20世纪70年代以后，伴随着微弱光检测技术的发展才得到广泛的研究和应用。第26页，共50页，星期日，2025年，2月5日酸性高锰酸钾体系（1）高锰酸钾-待测物体系酸性介质中，该体系可直接测定二氧化硫、丁丙诺非、对氨基苯甲酸酯类麻醉剂、肾上腺素、维生素C、5-羟色胺、可待因等组分。（2）高锰酸钾-甲醛-待测物体系可以对甲胺嘌呤、双氯芬酸、氨基比林、L-色氨酸、碘、酪氨酸等组分进行检测。（3）高锰酸钾-连二亚硫酸钠-待测物体系可测定维生素B6、利血平、胡延索乙素、核黄酸等组分。第27页，共50页，星期日，2025年，2月5日四价铈可直接与多种还原性无机物或者有机物放生氧化还原反应，是强氧化性化学发光剂之一。发光体系虽然简单，但由于不收Cl-的影响，更合适水样中有机物污染的检测。第28页，共50页，星期日，2025年，2月5日四价铈体系（1）铈-待测物体系可用于检测对乙酰氨基酚、色氨酸。（2）铈-联苯三酚-氧体系可检测环境水样中的溶解氧。（3）Ce4+-SO32--体系利用某鞋荧光性有机物对其的增敏作用，可以测定奎宁、奎宁丁、辛可丁、胆汁酸和多种皮质类固醇、甾族化合物。（4）Ce4+-RhB（罗丹明B）-还原性待测物体系用于测定叶酸、巯嘌呤、维生素C（盐）和噻唑类席夫碱。（5）Ce4+-Ru（phen）32+（二价钌-邻菲啰啉配合物）体系可用于草酸、丙酮酸、维生素C、枸橼酸、酒石酸、戊二醛和部分氟代喹诺酮衍生物的测定。第29页，共50页，星期日，2025年，2月5日吖啶酯化合物：该化合物是应用最广泛的化学发光剂之一。代表性物质为光泽精，在碱性介质中，光泽精-H2O2金属离子、还原性化合物以及产生H2O2基质或酶的测定。第30页，共50页，星期日，2025年，2月5日三仪器装置第31页，共50页，星期日，2025年，2月5日第32页，共50页，星期日，2025年，2月5日装置流程：发光反应室光检测器信号放大器显示与记录发光反应可采用静态或流动注射的方式进行：静态方式：用注射器分别将试剂加入到反应器中混合，测最大光强度或总发光强度；试样量小，重复性差；流动注射方式：用蠕动泵分别将试剂连续送入混合器，定时通过测量室，连续发光，测定最大光强度；试样量大；第33页，共50页，星期日，2025年，2月5日化学发光仪第34页，共50页，星期日，2025年，2月5日LUM-F流动注射化学发光仪器第35页，共50页，星期日，2025年，2月5日第1页，共50页，星期日，2025年，2月5日基本原理常用的化学发光物质仪器装置影响化学发光的因素定性定量分析第2页，共50页，星期日，2025年，2月5日化学发光（chemiluminescence）：又称为冷光，它是在没有任何光、热或电场等激发的情况下由化学反应而产生的光辐射。由于不需要外源性激发光源，避免了背景光和杂散光的干扰，降低了噪声，大大提高了信噪比。具有灵敏度高，线性范围宽，设备简单，操作方便，易于实现自动化，分析快等特点。在生物工程学，药物学，分子生物学，临床和环境化学等各个领域正显示出它蓬勃的生机。第3页，共50页，星期日，2025年，2月5日一、基本原理化学发光反应：顾名思义，伴随着光辐射发生的化学反应