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细胞培养技术试卷及答案

考试时间：______分钟总分：______分姓名：______

一、选择题（每题2分，共20分。请将正确选项的字母填在题干后的括号内）

1.细胞培养最基本的要求是（）。

A.温度控制B.恒定pHC.无菌环境D.高氧浓度

2.用于大多数哺乳动物细胞培养的常用培养基pH范围是（）。

A.6.0-6.5B.6.5-7.0C.7.0-7.5D.7.5-8.0

3.在细胞培养中，胰蛋白酶的主要作用是（）。

A.提供营养B.维持pHC.消化细胞外基质D.促进细胞增殖

4.下列哪种方法不属于常用的细胞计数方法？（）

A.血球计数板法B.酶联免疫吸附测定法（ELISA）C.荧光细胞计数仪法D.台盼蓝染色法

5.细胞冻存时通常使用的保护剂是（）。

A.葡萄糖B.乳糖C.胰岛素D.甘露醇

6.原代细胞培养与细胞系相比，其主要特点是（）。

A.生长增殖速度快B.可传代次数多C.需要特殊培养基D.易发生异质性

7.细胞培养过程中，造成细胞污染的最常见类型是（）。

A.细菌污染B.真菌污染C.病毒污染D.以上都是

8.下列哪种培养基成分是天然成分？（）

A.胰蛋白酶B.丝裂霉素CD.乳清

9.适用于长期保存细胞遗传性状的最好方法是（）。

A.临时冷冻保存B.低温冷冻保存C.超低温冷冻（液氮）保存D.离体快速培养

10.下列关于CO2培养箱作用的描述，错误的是（）。

A.提供细胞生长所需的CO2B.调节培养箱内温度C.维持培养箱内湿度D.调节培养箱内pH

二、填空题（每空1分，共15分。请将正确答案填在横线上）

1.细胞培养应在_________条件下进行，以防止微生物污染。

2.培养基通常分为_________培养基和合成培养基两大类。

3.细胞传代时，常用_________消化贴壁细胞。

4.MTT法是一种检测细胞_________的常用方法。

5.细胞冻存时，应先将细胞悬液在_________梯度冷冻。

6.常见的细胞污染类型有细菌污染、真菌污染和_________污染。

7.培养基中的无机盐主要提供细胞生长所需的_________和维持细胞正常的_________。

8.细胞培养最常用的容器是_________和培养瓶。

9.贴壁依赖性细胞培养时，需在培养容器底部制备_________。

10.限制细胞系传代次数的主要原因是_________。

三、判断题（每题1分，共10分。请将正确答案填在题干后的括号内，正确打“√”，错误打“×”）

1.所有类型的细胞培养都只能在完全无菌的条件下进行。（）

2.培养基中的氨基酸和维生素都是细胞生长所必需的营养物质。（）

3.传代次数越多的细胞，其遗传稳定性通常越好。（）

4.台盼蓝染色法可以区分活细胞和死细胞。（）

5.细胞冻存时，直接将细胞悬液放入液氮中保存效果最好。（）

6.CO2培养箱的主要作用是提供细胞代谢所需的CO2。（）

7.液体培养基适用于需要快速细胞增殖的实验。（）

8.细胞培养过程中，pH的稳定对细胞生长至关重要。（）

9.原代细胞培养的整个过程无需进行无菌操作。（）

10.细胞系是指从原代细胞中首次分离建立的细胞群体。（）

四、名词解释（每题3分，共15分）

1.细胞培养

2.培养基

3.细胞传代

4.细胞冻存

5.无菌技术

五、简答题（每题5分，共20分）

1.简述细胞培养过程中进行无菌操作的主要措施。

2.简述合成培养基相比天然培养基的主要优点。

3.简述细胞计数的主要方法及其原理。

4.简述细胞冻存的基本步骤。

六、论述题（10分）

试述进行细胞培养时，如何保证细胞的正常生长和维持其遗传稳定性。

试卷答案

一、选择题（每题2分，共20分）

1.C

*解析思路：细胞培养的核心是提供适宜环境，无菌是基础，温度、pH、气体是重要参数，但无菌环境是首要且绝对的要求，防止污染干扰细胞生长或导致实验失败。

2.C

*解析思路：大多数哺乳动物细胞培养最适宜的pH接近生理pH，为7.0-7.5之间，过高或过低都会影响酶活性和细胞功能。

3.C

*解析思路：胰蛋白酶能够特异性地水解细胞间的蛋白质连接（主要是蛋白质多糖），使贴壁细胞松脱，便于传代。

4.B

*解析思路：血球计数板