精液稀释保存教学.pptxVIP

娄底职业技术学院李继仁;课时教学计划;带着问题学;5.4精液稀释;精液稀释液的成分及作用

1）营养剂：常用的营养物质有葡萄糖、果糖、乳糖、奶和卵黄。主要提供营养以补充精子生存和运动所消耗的能量。

2）稀释剂：主要用于扩大精液容量，各种营养物质和保护物质的等渗溶液都具有稀释精液、扩大容量的作用，只不过其作用有主次之分而已。一般单纯用于扩大精液量的物质多采用等渗氯化钠、葡萄糖、果糖、蔗糖和奶类等。;3）保护性物质

（1）缓冲物质：常用的有柠檬酸钠、酒石酸钾钠、磷酸二氢钾等。精液在保存过程中，随着精子代谢产物如乳酸和二氧化碳的积累，PH值会逐渐降低，超过一定的限度时，会使精子发生不可逆的变性。因此，为防止精液保存过程中的PH值变化，常加入一些缓冲剂。

（2）防冷抗冻物质：在精液的低温和冷冻保存中，必须加入防冷抗冻剂以防止精子冷休克和冻害的发生。常用的防冷剂有：卵黄和奶类。

（3）抗冻物质：常用的抗冻剂有：甘油、二甲亚砜、Tris（三羟甲基氨基甲烷）。

（4）抗菌物质：主要有：青霉素、链霉素和氨苯磺胺、林肯霉素、卡那霉素、多黏霉素和恩诺沙星等。主要是抑制细菌生长繁殖，延长精子存活时间。;（5）非电解质和弱电解质：可以降低精液的电解质浓度，减少电解质对精液保存的不良作用。常用的非电解质和弱电解质有：各种糖类、氨基乙酸、甘氨酸等。

（6）其它添加剂：主要作用于改善精子外在环境的理化特性，以及母畜生殖道的生理机能，以利于提高受精机会，促进受精卵的发育。常用的有：

①酶类：如过氧化氢酶能分解精子代谢过程中产生的过氧化氢，β-淀粉酶具有促进精子获能，提高受胎率的作用。

②激素类：如催产素、PGE等可促进母畜生殖道蠕动有利于精子运行而提高受胎率。

③维生素类：如维生素B1、B2、B12、C、E等，具有改善精子活率，提高受胎率的作用。;稀释液配制

配制时要注意下列事项：

①配制稀释所使用的一切用具必须彻底洗涤干净，严格消毒；

②所用蒸馏水或去离子水要新鲜，药品要求用分析纯或化学纯，配制的稀释液要严格消毒；

③使用的鲜奶需经过滤后在水浴（92-95℃）中灭菌10分钟，卵黄要取自新鲜鸡蛋，搅拌要充分；

④药物称量要准确，要用分析天平；

⑤抗生素、酶类、激素类、维生素等添加剂必须在稀释液冷却至室温时，方可加入。氨苯磺胺可先溶于少量蒸馏水（用量计入总量）中，单独加热至80度，溶解后加入稀释液。

⑥稀释液要求现配现用，保持新鲜，且要严格消毒。;稀释倍数和稀释方法

1）稀释倍数确定

精液以稀释液进行适宜的稀释可以延长精子的存活时间，但稀释倍数超过一定限度，精子的存活即会随着稀释倍数的提高而逐渐下降，以致影响受胎率。

精液适宜稀释倍数与家畜种类和稀释液种类有关。确定稀释倍数应根据原精液的质量，尤其是精子的活率和密度、每次输精所需的精子数、稀释液的种类和保存方法来确定。一般牛4~6倍，猪1~3倍，兔3~5倍，羊2~4倍、鸡1~2倍、犬1~3倍。;;2）稀释方法

（1）精液经检查合格后应立即进行稀释，越快越好；

（2）稀释时，稀释液的温度和精液的温度必须调整一致，以30-35℃为宜；

（3）稀释时，将稀释液沿精液瓶或插入的灭菌玻璃棒缓慢倒入，防止剧烈震荡；

（4）若作高倍稀释，应先低倍后高倍，分次进行稀释；

（5）稀释后精液立即进行分装（一般按一头母畜的输精量）保存。;稀释液和精液的温度必须调整一致;将稀释液沿精液瓶缓慢倒入精液中;5.5精液保存;常温保存

保存温度在15-25℃，允许温度有一定的变动幅度，所以亦称变温保存或室温保存。常温保存所需设备简单，便于普及推广，特别适宜于猪的全份精液保存。

1）原理精子的活动在弱酸性环境中受到抑制，能量消耗降低，一旦PH值恢复到中性左右，精子又可复苏。常温利于微生物的生长，因此，还必须加入抗菌素，此外，加入必要的营养物质及隔绝空气等有益于精液保存。;2）稀释液

猪精液的稀释液配方：葡萄糖5克，柠檬酸钠0.3克，乙二胺四乙酸二钠0.1克，蒸馏水100毫升，青霉素1000单位，链霉素1000微克。

常用的猪、马、绵羊精液常温保存稀释液配方表见教材。

现在市场有商品稀释粉出售。;3）保存方法

一般是将稀释后的精液装瓶密封，用纱布或毛巾包裹好，置于15-25℃温度中避光存放。

①一般保存在17±0.5℃恒温箱中，每隔12h翻转一次。

②旱井保存法：建一个室内旱井，里面不积水，应干燥。一般用空心水泥管，直径30公分，高4米左右，底部封死。可使温度维持在15-20℃，而且夏冬温度变化不大。

③水井保存法：精液用蜡封好以后，用绳子吊入水井4-6米深处，温度可维持在10-18℃??而且变化幅度不大。

④地窖保存法：在地势较高处，挖一个2-3米地窖，温度可保持在20℃左右。;猪的精液常温保存原理与稀释液配制技术;猪的