甘蔗固氮菌分离筛选及评价技术规范.pdfVIP

ICS65.020.20

CCSB05

GXAS

团体标准

T/GXASXXXX—XXXX

甘蔗固氮菌分离筛选及评价技术规范

Technicalspecificationforscreeningandevaluationofnitrogen-

fixingbacteriastrainsfromsugarcane

（征求意见稿）

在提交反馈意见时，请将您知道的相关专利连同支持性文件一并附上。

XXXX-XX-XX发布XXXX-XX-XX实施

广西标准化协会发布

T/GXASXXXX—XXXX

前言

本文件参照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定

起草。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。

本文件由广西壮族自治区农业科学院提出并宣贯。

本文件由广西标准化协会归口。

本文件起草单位：广西壮族自治区农业科学院、广西大学、广西职业技术学院、农业部广西甘蔗生

物技术与遗传改良重点实验室、广西甘蔗遗传改良重点实验室、广西博庆食品有限公司。

本文件主要起草人：黄杏、李长宁、林丽、谢金兰、莫璋红、罗霆、梁强、农倩、邢永秀、梁宏卫、

彭东海、韦海勇、宋修鹏、卢海发、韦淙凯、董登峰、李杨瑞、石浩丁、颜才富、梁光凤。

I

T/GXASXXXX—XXXX

甘蔗固氮菌分离筛选及评价技术规范

1范围

本文件界定了甘蔗固氮菌的术语和定义，规定了材料准备、固氮菌分离和保存、固氮菌基本特性和

固氮功能鉴定、固氮菌促植物生长功能评价、固氮菌抗胁迫能力评价、评价报告。

本文件适用于甘蔗固氮菌分离筛选及评价。

2规范性引用文件

本文件没有规范性引用文件。

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

甘蔗固氮菌nitrogen-fixingbacteriastrainsfromsugarcane

能与甘蔗形成联合固氮关系的微生物。

4材料准备

样品采集

从主产区采集健康甘蔗植株，可分为根（带土）、茎、叶、花等组织部位，分别用容器装好，贴好

标签并注明采样地点、时间和甘蔗品种名称，样品放入4℃冰箱中保存，宜在3d内完成固氮菌分离操

作。

仪器设备

主要仪器设备见附录A，

实验试剂

鉴定所用试剂均为市场化采购分析纯试剂。

培养基制备

主要培养基配制见附录B。

5固氮菌分离与保存

内生固氮菌分离

操作如下：

a)称取1g甘蔗组织（茎、叶、花等），用无菌水冲洗干净表面。在超净工作台上先用70％酒精

浸30s，无菌水冲洗3次，再用0.1％升汞浸1min，70％酒精浸30s，后用无菌水冲洗干净；

b)将组织置于无菌研钵中，加入10mL磷酸缓冲液，研磨成匀浆，静置5min待澄清；

c)取上清液用无菌水做10倍系列梯度稀释，取原液和各梯度稀释液100µl分别平铺在Ashby固

体培养基上，28℃培养3d～5d至长