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转AM79-EPSPS耐除草剂基因大豆新材料的创制：技术、效果与展望

一、引言

1.1研究背景与意义

大豆作为全球重要的农作物，在农业经济和人类生活中占据着举足轻重的地位。从粮食角度来看，大豆富含优质蛋白质，是人类膳食中植物蛋白的重要来源，为满足人体对蛋白质的需求发挥关键作用，对于一些地区和人群，大豆及其制品更是日常饮食中不可或缺的部分。在油料领域，大豆油是世界上最主要的食用油之一，其产量大、价格相对稳定，广泛应用于家庭烹饪和食品加工行业。在饲料方面，大豆粕凭借高蛋白质含量和合理的氨基酸组成，成为禽畜养殖中优质的蛋白质饲料原料，为肉类、奶制品和蛋类等高蛋白食品的供应提供了有力支持。此外，大豆还具有固氮作用，能够改善土壤肥力，减少化肥使用，促进可持续农业发展，在农业生态系统中意义重大。

然而，杂草危害是制约大豆生产的重要因素之一。大豆田杂草种类繁多，如稗草、狗尾草、牛筋草等禾本科杂草以及藜、鸭跖草、苋、龙葵、刺儿菜等阔叶杂草。这些杂草从大豆播种期开始至8月末均能不断发生，且基本与大豆幼苗同步生长，在5月下旬至6月中旬进入发生高峰期，约占全年大豆田杂草发生量的60%。杂草与大豆激烈竞争阳光、水分、养分等资源，严重影响大豆的生长发育，导致大豆减产。在一些人少地多、管理粗放的地区，6-8月杂草发生期恰逢雨季，常常造成草荒。若大豆封垅前除草不彻底，残余的苗眼草秋季会长成高大杂草，不仅降低产量，还会给机械收割带来困难，增加生产成本。

传统的杂草防治方法主要依赖化学除草剂，但长期、大量使用传统除草剂带来了诸多问题。一方面，传统除草剂可能会对大豆产生药害，影响大豆的正常生长和发育，导致产量降低；另一方面，除草剂残留问题日益严重，不仅污染土壤、水源等环境，还可能通过食物链进入人体，危害人体健康。此外，长期使用单一类型的除草剂容易使杂草产生抗药性，使得除草效果逐渐下降，进一步加大了杂草防治的难度。

为了解决杂草危害和传统除草剂带来的问题，创制耐除草剂大豆新材料迫在眉睫。通过基因工程技术将耐除草剂基因转入大豆，培育具有耐除草剂特性的大豆新品种，能够形成“灭生型除草剂+抗除草剂作物”的新型杂草控制模式。这不仅可以提高除草效果，有效控制杂草对大豆的危害，减少杂草与大豆竞争资源，从而保障大豆的产量和质量；还能减少除草剂的使用量和使用次数，降低生产成本，减轻对环境的污染，减少对非靶标生物的影响，有利于农业的可持续发展。此外，耐除草剂大豆新材料的创制对于提升我国大豆产业的竞争力，保障国家粮食安全和生态安全也具有重要意义。

1.2国内外研究现状

在耐除草剂基因研究方面，国内外取得了一系列重要进展。草甘膦是一种广泛使用的除草剂，其作用靶标是5-烯醇丙酮酰莽草酸-3-磷酸合酶（EPSPS）。科学家们围绕EPSPS基因开展了大量研究，通过不同策略来获得耐草甘膦的基因资源。例如，最早开发应用的抗草甘膦转基因作物采用过量表达EPSPS基因的策略，引入的基因表达一种被称为5-烯醇丙酮酰莽草酸-3-磷酸合酶（EPSPS）的芳香族氨基酸合成关键酶，是草甘膦的靶标酶，草甘膦通过与植物体内的磷酸烯醇丙酮酸竞争性地结合EPSPS的活性位点。EPSPS过量表达可保证芳香族氨基酸正常合成，避免植物因氨基酸缺乏而死亡。当前应用的该基因主要有来自农杆菌CP4的cp4-epsps基因和来自玉米突变的zm-2mepsps基因，其中cp4-epsps基因被广泛应用于大豆、棉花、玉米、油菜、苜蓿和甜菜等转基因种质的创制中。此外，还可以通过对EPSPS基因进行修饰，使其与除草剂结合的效率降低，或者引入能够降解除草剂的酶或酶系统，在除草剂发生作用前将其降解或解毒，从而获得耐除草剂的特性。

针对转AM79-EPSPS基因大豆的研究，近年来也受到了一定关注。利用宏基因组学方法从受草甘膦污染的土壤中分离得到了抗除草剂的AM79EPSPS基因。该基因编码的EPSP合成酶是生物体内芳香族氨基酸——色氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸生物合成过程中的关键性酶，而草甘磷是通过抑制EPSP合成酶的活性而阻断芳香族氨基酸的合成最终导致受试植物死亡。但某些细菌的EPSP合成酶的活性不被草甘膦所抑制，将AM79EPSPS基因构建植物组成型表达载体psoy19，由35S启动子驱动，可以为转基因植物提供草甘膦抗性。通过农杆菌介导法，已将该外源基因转化大豆华春3号和Jack品种并获得转EPSPS基因的抗除草剂转基因大豆材料。2024年1月18日，农业农村部发布的2023年农业转基因生物安全证书（生产应用）批准清单中，新安股份的耐除草剂大豆WYN0