明小花蝽卵黄原蛋白的鉴定及表达分析.pdfVIP

山东农业科学２０２４ꎬ５６(８):１３７~１４５ＳｈａｎｄｏｎｇＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ

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ＤＯＩ:１０.１４０８３/ｊ.ｉｓｓｎ.１００１４９４２.２０２４.０８.０２０

明小花蝽卵黄原蛋白的鉴定及表达分析

１ꎬ２２２２３２２

杜会玲ꎬ王瑞娟ꎬ覃冬云ꎬ陈浩ꎬ郭琳ꎬ刘艳ꎬ苏龙ꎬ

２２２１２

代晓彦ꎬ赵珊ꎬ郑礼ꎬ董小林ꎬ翟一凡

(１.长江大学农学院/农业农村部长江中游作物绿色高效生产重点实验室ꎬ湖北荆州４３４０２５ꎻ

２.山东省农业科学院植物保护研究所/农业农村部天敌昆虫重点实验室ꎬ山东济南２５０１００ꎻ

３.郓城县农业农村局ꎬ山东郓城２７４７００)

摘要:本研究对明小花蝽Ｏｒｉｕｓｎａｇａｉｉ的卵黄原蛋白(ｖｉｔｅｌｌｏｇｅｎｉｎꎬＶｇ)进行结构分析、原核表达、抗体制备

以及时空动态表达分析ꎬ旨在为昆虫卵黄原蛋白的研究提供理论依据ꎮ用ＲＡＣＥ方法克隆出ＯｎＶｇ基因全

长ꎬ运用生物信息网站分析ＯｎＶｇ蛋白得出其具有３个保守结构域:脂蛋白Ｎ端结构域、未知功能结构域以及

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血管性血友病因子结构域ꎮ构建ＯｎＶｇ的原核表达载体ｐＥＴ３２ａｃ()ＯｎＶｇꎬ转至大肠杆菌进行诱导表达ꎬ

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通过免疫昆明小鼠制备了ａｎｔｉＯｎＶｇ抗体ꎮＷｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ结果显示ａｎｔｉＯｎＶｇ抗体与ＯｎＶｇ蛋白能够特异性结

合ꎮｑＰＣＲ检测Ｖｇ基因在明小花蝽若虫、成虫阶段和成虫不同组织中的时空动态表达ꎬ结果表明Ｖｇ基因在

若虫阶段最低ꎬ成虫阶段表达量升高且３ｄ时表达水平达到最高ꎻ成虫腹部表达量最高ꎬ其次是肠道和卵巢ꎮ

本研究结果可为探究明小花蝽的生殖调控机理提供理论支持ꎮ

关键词:明小花蝽ꎻ卵黄原蛋白ꎻ原核表达ꎻ抗体制备ꎻ时空表达

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中图分类号:Ｓ４７６.２:Ｑ７８６文献标识号:Ａ文章编号:１００１４９４２(２０２４)０８０１３７０９

ＩｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎａｎｄＥｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＶｉｔｅｌｌｏｇｅｎｉｎｉｎＯｒｉｕｓｎａｇａｉｉ

１ꎬ２２２２３２

ＤｕＨｕｉｌｉｎｇꎬＷａｎｇＲｕｉｊｕａｎꎬＱｉｎＤｏｎｇｙｕｎꎬＣｈｅｎＨａｏꎬＧｕｏＬｉｎꎬＬｉｕＹａｎꎬ

２２２２１２

ＳｕＬｏｎｇꎬＤａｉＸｉａｏｙａｎꎬＺｈａｏＳｈａｎꎬＺｈｅｎｇＬｉꎬＤｏｎｇＸｉａｏｌｉｎꎬＺｈａｉＹｉｆａｎ

(１.ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅꎬＹａｎｇｔｚｅＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ/ＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙ