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Rab11效应因子FIP3调控CamKII突触转位的机制研究

浙江大学医学院神经生物学

硕士研究生：王海婷

导师：邱爽教授

中文摘要

CamKII（Ca2+/calmodulindependentproteinkinaseII）是参与形成长时程增强

（Long-termpotentiation,LTP）的重要激酶，CamKII的激活是LTP诱导的必要条

件之一，而CamKII与actin的结合对于结构LTP的形成也起到非常重要的作用。

研究表明，CamKII会随着神经元的活性改变而发生转位（translocation），但这种

转位机制目前还不清楚。由于能够结合到NMDAR上的CamKII数量极少，而且

运用actin解聚剂也无法影响CamKII的定位，我们推测还有其他重要的蛋白参与

并调控CamKII转位。我们课题组一直以来对RabGTPase及其效应因子的功能有

着深入研究，在研究RIM1参与调控小鼠海马NMDA受体的运输机制时通过质谱

检测发现了NMDA受体复合物中存在FIP3（Rab11family-interactingprotein3），

而FIP3作为Rab11的效应因子引起了我们的注意。进一步实验发现，FIP3在中枢

的表达量非常高，在海马CA1区FIP3敲减后能够特异性影响LTP而不影响LTD，

同时质谱结果分析发现，FIP3的复合物中存在CamKII。于是我们推测FIP3对LTP

的影响可能与CamKII的转位有关。为了进一步研究FIP3是否调控CamKII转位，

以及其内的分子机制，我们首先利用GST-pulldown等生化实验技术发现FIP3与

CamKII有直接的相互作用，而且结合位点受到Ca2+的调控。敲减FIP3能显著增

加CamKII与PSD95的共定位而不影响CamKII与NR2B的共定位，敲减后再激

活神经元则不能进一步增加CamKII与PSD95的共定位却仍能够增加CamKII与

NR2B的共定位。除此之外，FIP3的敲减会显著增加神经元的树突数量和长度。

我们对FIP3knockout小鼠生化检测，发现前额叶皮层和杏仁核区域的突触相关蛋

白的表达量也有显著改变。因此我们得出结论，FIP3敲减影响了CamKII的定位，

使其堆积在PSD组分中，不能受到神经活性调控发生进一步的定位改变，从而影

响LTP。

关键词：CaMKII，转位，FIP3，敲减，LTP，PSD，NR2B

MechanismsunderlyingRab11effectorFIP3-regulated

translocationofCamKIIwithinsynapses

Abstract

CamKII(Ca2+/calmodulindependentproteinkinaseII)isanimportantkinase

involvedintheformationoflong-termpotentiation(LTP).ActivationofCamKIIisone

ofthenecessaryconditionsforLTPinduction,andthecombinationofCamKIIandactin

alsoplaysaveryimportantroleintheformationofstructuralLTP.Studieshaveshown

thatCamKIItranslocateswithchangesinneuronalactivity,butthemechanismofthis

translocationisstillunclear.SincethenumberofCamKIIbinding