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392JDiagPathol,April2023,Vol.30,No.4

doi:10.3969/j.issn.1007-8096.2023.04.023技术研究

硫董试剂的配制温度对细胞DNA定量分析的影响

田澄，王志强，武春春，金玉兰

（首都医科大学附属北京妇产医院/北京妇幼保健院病理科，北京100006)

[关键词]Feulgen染色;硫董试剂；温度

[中图分类号]R331[文献标识码]B【文章编号]1007-8096(2023）04-0392-02

细胞DNA定量分析系统对于宫颈癌早期诊断及癌前病36.0%~38.0%，国药），配制成4份硫堇试剂（F30、F40、

变评估具有有效的诊断意义及临床应用价值[1-2]。FeulgenF45、F50），室温搅拌1h后放入30℃恒温箱内备用。

染色法是DNA定量检测的标准方法[3]。由于Schiff试剂的1.3.3台

制片、染色及分析①将玻片放入染缸后加固定液

质量和配制条件等是Feulgen反应成功与否的关键因素，田（60min），水洗4~5次；②加人水解液（45min），水洗4~5

玉旺等[4]采用硫堇试剂替换Schiff试剂对细胞核DNA进行次；③加人对应的硫堇染色液（1h），水洗1min;④清水浸泡

染色获得了良好的染色效果。为进一步提升Feulgen-硫堇10min后依次浸人70%乙醇、80%乙醇，吹干后封片。

染色的质量，本实验通过探讨硫堇试剂的配制温度对DNA全自动DNA定量分析系统扫描，对比不同条件下积分

定量分析染色效果的影响，提高细胞学诊断的敏感性和特光密度（integratedopticaldensity，IOD）与变异系数

异性。（coefficientofvariance，CV）在各组分之间的区别。IOD值

评估玻片的染色情况，IOD值过高会造成假阳性，过低易造

1林

材料与方法

成假阴性，IOD值控制在13~17之间被认定为染色结果较

1.1实验样本2021-04在首都医科大学附属北京妇产医

好。CV值表示标本扫描的清晰度和样本染色的稳定性。同

院随机选取6例宫颈脱落细胞标本（S1~S6)。

一玻片上的CV值小于10%时被认为清晰度高，稳定性好，

1.2主要仪器及耗材全自动DNA定量分析系统，DNA

染色结果较好。

倍体染色套装（A瓶：0.08g硫堇，B瓶：0.15g亚硫酸

氢钠）。2结果

1.3实验方法所有染色结果的IOD值统计如图1所示：在同一样本

1.3.1标本准备分别将6例临床宫颈标本制成4张玻中,随着硫试剂的配制温度的升高,IOD值升高。当硫堇

片，根据染色温度不同对玻片编号。试剂的配制温度为30℃和40℃时，I0D值的平均值为

1.3.2①固定液：10ml的甲醛（浓度37.%~14.98染色结果较好；硫堇试剂的配制温度为45℃和50℃

试剂配制

40.0%，国药）与90ml的95%乙醇（酒精）混匀备用。②水时，I0D值平均值为19.789染色效果偏深。

解液：150ml蒸馏水与150ml盐酸（浓度36.0%~38.0%，国所有染色结果的CV值统计如图2所示：不同温度配制

药）混匀备用。③硫堇染色液：准备4份纯净水（每份200的硫堇试剂的