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木聚糖酶发酵车间的工艺流程分析案例

目录

TOC\o1-3\h\u3897木聚糖酶发酵车间的工艺流程分析案例 1

134691.1高产木聚糖酶的黑曲霉工程菌株的选取 1

205331.2黑曲霉工程菌株发酵生产木聚糖酶 1

278561.1.1菌种活化 1

206841.1.2一级种子培养 1

80971.1.3二级种子培养 2

26081.1.4发酵罐发酵 2

120401.3发酵液后处理获得木聚糖酶 2

56061.3.1板框压滤 2

62221.3.2喷雾干燥 3

16601.3.3筛分分级和包装 3

195721.4工艺流程 4

1.1高产木聚糖酶的黑曲霉工程菌株的选取

根据杨付伟等人的对于空间诱变选育高产木聚糖酶工程菌种的研究,原始菌株黑曲霉TG-Y经过空间诱变,黑曲霉菌株菌落形态和产酶能力发生了不同程度的变化,通过多次首筛、复筛筛选出优势菌株SP1-523,和SP2-801,其可以相对高效分泌木聚糖酶,与原始菌株酶活力相比提高20.22%和21.76%,遗传性质平稳,在该项设计中,选取其作为工程菌株使用。

1.2黑曲霉工程菌株发酵生产木聚糖酶

1.1.1菌种活化

采用平板划线法将菌种接种于PDA培养基(马铃薯葡萄糖琼脂培养基)中,事先在平板底部做好记号,于30℃、220r/min的条件下培养24h,等到看到培养液浑浊时,说明成功长出微生物单菌落,此时通过电子显微镜观察有无杂菌污染,若并未出现异常情况,则种子活化效果较好,可以进行下一步操作。

1.1.2一级种子培养

将上述经过活化的种液通过灭菌钢瓶转移接入一级种子罐中。培养基采用高压蒸汽灭菌40min,表压为100Kpa,于30℃培养18h。

种子培养液的构成如下:

玉米粉60g/L;玉米浆20g/L;麸皮40g/L;MgSO41g/L;(NH4)2SO45g/L;KH2PO43g/L;聚乙二醇20000.5g/LPH5.20;

1.1.3二级种子培养

将上述一级种子罐培养出来的种子液接入装有更多培养液的二级种子罐中,同样采用高压蒸汽灭菌法于100Kpa表压下灭菌2min,之后将种液立即冷却至30℃左右,在此温度下培养6h。当观察到整个表面孢子着色均匀,表现出成熟特征的颜色时,进行若干步扩大培养,培养量为10-15倍,仍旧在30℃下进行培养。

1.1.4发酵罐发酵

扩大培养后,为了在发酵罐上连续稳定运行,采用低浓度补料发酵工艺,发酵罐发酵周期内的控制工艺参数如下:

eq\o\ac(○,1).,溶氧以上,通风比,转速,30h开始补料,初始补料比;

eq\o\ac(○,2).h,菌丝量以上,还原糖,溶氧,通风,转速,、料比;

eq\o\ac(○,3).h,菌丝量,还原糖,溶氧以上,通风比左右,转速,补料比;

eq\o\ac(○,4).,菌丝量左右,还原糖,溶氧,通风比左右,转速,补料比;

1.3发酵液后处理获得木聚糖酶

1.3.1板框压滤

因为木聚糖酶成熟发酵醪残糖低,发酵醪温度升高有限,故采用隔膜压滤机能够很好地实现固液分离效率较好,且具有耐压高、耐腐蚀好、维修方便、安全可靠等优点,冶金、燃气、造纸、焦化、制药、食品、酿造、精细化工等行业客户的首选。

1.3.2喷雾干燥

工厂车间干燥方法有很多种,例如自然干燥、烘房干燥、气流干燥等,喷雾干燥就是气流干燥方法的一种,是流态化技术用于浸出液干燥的一种较好的方法,而经过板框压滤得到的粗酶液,是浸出液的一种,效果较好,故可采用这种方式对粗酶液进行干燥。在喷雾干燥塔中,直接将粗酶液喷雾于干燥器内使之与热空气发生冷热交换,将水分快速汽化,从而获得固体颗粒状和粉状产品。

1.3.3筛分分级和包装

本发酵车间生产的木聚糖酶产品主要是以酶制剂形式,售卖给饲料工业工厂,经过喷雾干燥后得到的粗产品,经过筛分设备(振动筛)筛分分级后,随机选取产品送入质检科检验,将合格产品送入包装车间包装。根据GB7300·401-2019,所生产的木聚糖酶固体产品要保证粒度均匀,流散性好,无发霉变质,无异味,有特殊发酵气味。而对于液体剂型,保证无异味,有特殊发酵气味即可。

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