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PCR实验室知识及新冠检测生物安全培训考试(试题与答案)

一、单项选择题（每题2分，共30分）

1.PCR实验室核心工作区域不包括以下哪项？

A.试剂准备区

B.样本处理区

C.扩增分析区

D.清洁消毒区

答案：D

解析：PCR实验室标准分区为试剂准备区、样本处理区（核酸提取区）、扩增区和扩增产物分析区（部分实验室合并扩增与分析区），清洁消毒区属于辅助区域，非核心工作区。

2.新冠病毒核酸检测样本（咽拭子）采集时，采集人员应穿戴的防护装备不包括？

A.N95/KN95口罩

B.护目镜或面屏

C.单层乳胶手套

D.医用防护服

答案：C

解析：样本采集需三级防护，包括N95/KN95口罩、护目镜/面屏、医用防护服、双层手套（内层乳胶手套+外层丁腈手套），单层手套无法满足生物安全要求。

3.以下关于PCR实验室压差控制的描述，正确的是？

A.试剂准备区为正压，样本处理区为负压

B.所有区域均保持常压

C.扩增区为正压，样本处理区为负压

D.各区域压差应≤5Pa

答案：A

解析：PCR实验室需通过压差防止交叉污染，通常试剂准备区（正压，+10-+15Pa）→样本处理区（常压或微负压）→扩增区（负压，-10--15Pa）→扩增产物分析区（负压），相邻区域压差应≥5Pa。

4.新冠病毒核酸检测中，“假阳性”最常见的原因是？

A.样本采集量不足

B.扩增产物污染

C.试剂灵敏度低

D.样本保存温度过高

答案：B

解析：PCR扩增产物（大量目标DNA片段）是实验室最主要的污染源，若操作不当（如扩增管未密闭、区域间物品混用），易导致后续实验出现假阳性。

5.生物安全柜使用时，正确的操作是？

A.实验物品全部摆放在安全柜边缘

B.操作时手臂快速进出安全柜

C.安全柜内同时进行两种不同样本处理

D.操作结束后，安全柜需运行15分钟后关闭

答案：D

解析：生物安全柜操作结束后，需继续运行15分钟以排出残留气溶胶；物品应摆放在安全柜中后部，避免遮挡回风口；手臂应缓慢进出，减少气流扰动；不同样本需分区操作，避免交叉污染。

6.新冠病毒核酸检测样本（拭子）保存运输时，常用的保存液是？

A.生理盐水

B.病毒保存液（含胍盐）

C.75%乙醇

D.磷酸盐缓冲液（PBS）

答案：B

解析：病毒保存液（含胍盐）可灭活病毒、保护核酸不被降解，是新冠样本保存的标准选择；生理盐水无灭活作用，乙醇会破坏核酸结构，PBS无法有效稳定核酸。

7.PCR实验室工作人员手部被样本污染后，应立即采取的措施是？

A.用清水冲洗后继续操作

B.脱去手套，用0.5%含氯消毒液擦拭，更换新手套

C.用75%乙醇喷洒手套表面

D.用肥皂洗手后涂抹护手霜

答案：B

解析：样本可能含病毒，污染后需立即脱去污染手套，用0.5%含氯消毒液（或75%乙醇）擦拭暴露皮肤，更换双层手套；仅冲洗或喷洒无法彻底灭活病毒。

8.以下哪项不符合PCR实验室“单一流向”原则？

A.人员从试剂准备区→样本处理区→扩增区

B.物品通过传递窗从样本处理区→扩增区

C.废弃物从扩增区→样本处理区→专用暂存点

D.清洁工具分区专用，不得跨区使用

答案：C

解析：PCR实验室需严格遵循“单向气流、单向物品流向”，废弃物应从高污染区（扩增区）直接密封后送至专用暂存点，禁止逆向流动（如返回样本处理区）。

9.新冠病毒核酸检测中，“内标”的主要作用是？

A.验证扩增仪温度准确性

B.监测样本采集是否合格

C.排除假阴性（抑制物干扰）

D.提高检测灵敏度

答案：C

解析：内标（人工合成的非目标基因片段）与样本核酸同时提取、扩增，若内标未扩增，提示样本中存在PCR抑制物（如血红蛋白、痰液成分），需重新处理样本，避免假阴性。

10.生物安全二级实验室（BSL-2）的基本要求不包括？

A.入口处设生物危害标识

B.配备洗眼装置

C.通风系统为直排式（非循环）

D.所有操作均在生物安全柜中进行

答案：D

解析：BSL-2实验室中，可能产生气溶胶的操作（如样本涡旋、离心）需在生物安全柜中进行；常规加样、记录等低风险操作可在开放实验台完成，但需佩戴手套、口罩。

11.PCR实验室“清洁区”与“污染区”的分界标识应设置在？

A.各区域入口处地面

B.实验室主入口墙面

C.传递窗上方

D.走廊与实验室连接处

答案：A

解析：为明确区域划分，