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pcr新冠培训上岗试卷及答案

一、单项选择题（每题2分，共30题，合计60分）

1.新冠病毒核酸检测实验室（PCR实验室）严格分区管理中，各区域的空气流向应为：

A.试剂准备区→样本处理区→扩增区→扩增产物分析区

B.样本处理区→试剂准备区→扩增区→扩增产物分析区

C.扩增产物分析区→扩增区→样本处理区→试剂准备区

D.试剂准备区→扩增区→样本处理区→扩增产物分析区

2.新冠病毒核酸检测使用的咽拭子采集时，正确的操作是：

A.擦拭双侧扁桃体及咽后壁，避免接触舌部

B.仅擦拭单侧扁桃体，无需接触咽后壁

C.快速掠过舌面后立即取出

D.采集前30分钟让受检者饮用温水

3.实时荧光定量PCR检测中，Ct值的定义是：

A.荧光信号达到设定阈值时的扩增循环次数

B.扩增产物达到最大浓度时的循环次数

C.荧光信号首次出现时的循环次数

D.基线期结束时的循环次数

4.新冠病毒核酸检测标本保存与运输的正确要求是：

A.24小时内检测的标本可4℃保存，超过24小时需-70℃以下保存

B.所有标本均需在-20℃保存，运输时使用普通冰袋

C.标本采集后可常温放置48小时再检测

D.运输时标本与冰袋直接接触，无需分隔

5.PCR实验室样本处理区（二区）的主要功能是：

A.扩增反应混合液的配制

B.样本的核酸提取、逆转录

C.PCR扩增反应的进行

D.扩增产物的分析与记录

6.新冠病毒核酸检测中，若阴性对照出现扩增曲线，最可能的原因是：

A.试剂过期

B.样本交叉污染

C.扩增仪温度不准确

D.加样体积误差

7.关于生物安全柜的使用，错误的操作是：

A.操作前用75%酒精擦拭台面，开机运行10分钟

B.物品在柜内按“清洁区→污染区”方向摆放

C.操作时手臂频繁进出柜门，保持操作连贯性

D.操作结束后用紫外线照射30分钟

8.核酸提取过程中，若离心管未盖紧导致液体外溢，应立即：

A.用纸巾擦拭后继续操作

B.停止操作，用含有效氯1000mg/L的消毒液覆盖污染区域30分钟后清理

C.直接用75%酒精喷洒消毒

D.更换手套后继续处理其他样本

9.实时荧光PCR仪的校准周期通常为：

A.每3个月

B.每6个月

C.每12个月

D.每24个月

10.新冠病毒ORF1ab/N基因检测结果中，若仅ORF1ab基因阳性、N基因阴性，正确的处理是：

A.判定为阳性

B.判定为阴性

C.重新提取核酸并复检

D.报告“检测结果不确定”

11.核酸提取试剂（如磁珠法）的保存温度通常为：

A.-20℃

B.4℃

C.室温（15-25℃）

D.-80℃

12.实验室发生样本管破裂导致污染时，正确的消毒流程是：

A.立即用清水冲洗，再用酒精擦拭

B.用吸水纸覆盖污染区域，倒上含有效氯5000mg/L的消毒液，作用30分钟后清理

C.直接使用紫外线照射1小时

D.用肥皂水擦拭后通风

13.新冠病毒核酸检测的灵敏度要求是：

A.至少检测到1000拷贝/毫升

B.至少检测到500拷贝/毫升

C.至少检测到100拷贝/毫升

D.至少检测到50拷贝/毫升

14.扩增产物分析区（四区）的设备应避免与其他区域共享，主要是为了防止：

A.试剂浪费

B.人员疲劳

C.气溶胶污染

D.温度波动

15.关于咽拭子采集的防护要求，错误的是：

A.采集人员需穿戴医用防护口罩、护目镜、防护服、手套

B.每采集1人后更换手套

C.采集时与受检者保持0.5米距离

D.采集后将拭子垂直插入病毒保存液，避免触碰管口

16.实时荧光PCR反应体系配制时，错误的操作是：

A.在试剂准备区（一区）进行

B.移液器每次使用前校准

C.配制完成后立即转移至样本处理区

D.剩余试剂放回原瓶重复使用

17.核酸提取过程中，若漏加逆转录酶，可能导致：

A.Ct值异常降低

B.扩增曲线无信号（Ct值为“Undetermined”）

C.出现非特异性扩增

D.内标Ct值升高

18.实验室质量控制中，“室内质控”的主要目的是：

A.评估不同实验室间的检测一致性

B.监测本实验室检测过程的稳定性

C.验证新试剂的检测性能

D.考核检测人员的操作水平

19.新冠病毒核酸检测报告的“Ct值”通常需记录：