3药物分析基本知识.pptVIP

第二章药物分析基本知识;本章内容;生物药物分析方法;酶法;电泳法;优点：操作简便并兼备分离、鉴定、分析三大功能，灵敏度高、重现性好、检测范围广

常用的电泳法有纸电泳法、醋酸纤维素薄膜电泳法、聚丙烯酰胺凝胶电泳法、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法、琼脂糖凝胶电泳法等;理化法;生物检定法;萃取法;沉淀法;要求;1.称量形式与被测组分形式一样;非水滴定;;许多物质在水中Ka或Kb小于10-7，没有明显的滴定突跃，不能在水中滴定。

许多有机物在水中基本不溶或溶解甚少，不能在水中滴定。

强酸或强碱在水中全部离解为H+和OH-在水中不能区分强酸或强碱，不能分别滴定。;溶剂的分类;酸性溶剂：具有较强的给出质子能力的溶剂;碱性溶剂：具有较强的接受质子能力的溶剂;两性溶剂：既易给出质子、又易接受质子的溶剂;偶极亲质子性溶剂（无质子亲质子性溶剂）：

溶剂分子中无转移性质子，但具有较弱的接

受质子的倾向，且具有程度不同形成氢键的

能力;惰性溶剂：溶剂分子中无转移性质子和接受

质子的倾向，也无形成氢键的能力;混合溶剂：质子性溶剂与惰性溶剂混合;均化效应和区分效应;2．区分效应;对溶剂的要求;碱的滴定（碱量法）;(二)标准溶液与基准物质

滴定碱的标准溶液常采用高氯酸的冰醋酸溶液。;(三)应用与示例

具有碱性基团的化合物，如胺类、氨基酸类、含氮杂环化合物、某些有机碱的盐及弱酸盐等，大都可用高氯酸标准溶液进行滴定。;酸的滴定（酸量法）;(二)标准溶液与基准物质

常用的滴定剂为甲醇钠的苯-甲醇溶液。标定碱标准溶液常用的基准物质为苯甲酸。

常用的指示剂：百里酚蓝，偶氮紫，溴酚蓝。;(三)应用与示例

应用范围：羧酸类、酚类、磺酰胺类及其他。;思考题

1.非水滴定和水溶液滴定有何不同？

2.最常用的非水溶剂有哪几类？它们的性质和作用如何？

;沉淀滴定法（17页）;铬酸钾指示剂法（Mohr法）;铁铵钒指示剂法（Volhard法）;注意点;吸附指示剂法（Fayans法);注意事项;还原糖的测定;糖类的检测;应用;最常用的试剂：斐林（Fehling）试剂

基本组成：A：CuSO4溶液

B:NaOH和酒石酸钾钠溶液

使用时A、B等体积混合(生成酒石酸钾钠铜）

酒石酸钾钠铜是氧化剂，可与还原糖的游离羰基发生氧化还原反应，而进行糖的测定。;定糖常用方法;

将一定量的碱性酒石酸铜甲、乙液等量混合，立即生成天蓝色的氢氧化铜沉淀，这种沉淀很快与酒石酸钾钠反应，生成深蓝色的可溶性酒石酸钾钠铜络合物。在加热条件下，以亚甲基蓝作为指示剂，用样液滴定，样液中的还原糖与酒石酸钾钠铜反应，生成红色的氧化亚铜沉淀，待二价铜全部被还原后，稍过量的还原糖把亚甲基蓝还原，溶液由蓝色变为无色，即为滴定终点。根据样液消耗量可计算还原糖含量。;2NaOH+CuSO4=Cu(OH)2↓+Na2SO4;本法又称快速法，它是在廉-爱农容量法基础上发展起来的，其特点是试剂用量少，操作和计算都比较简便、快速，滴定终点明显。本法是国家标准分析方法。;操作要点;(2)定糖

（a）定糖预备试验

A、B各5mL＋10mL样品糖液（250mL三角瓶中）摇匀，加热至沸腾，＋2d1％亚甲基蓝溶液，用标准葡萄糖液滴定至蓝色消失，耗标准葡萄糖液（0.1％或0.2％）V2mL。

（b）定糖

A、B各5mL＋10mL样品糖液（250mL三角瓶中）摇匀，补加（V0-V2）mL水，并从滴定管中预先加入（V2-1)mL标准葡萄糖液，摇匀后加热加热至沸腾，＋2d1％亚甲基蓝溶液，用标准葡萄糖液滴定至蓝色消失（滴定在1min内完成），记录消耗标准葡萄糖液的总毫升数V;(3)计算

还原糖含量（以葡萄糖计）

＝（V0-V)×c×(1/10)×n

注意：

（a）A、B分开储存，防止Cu++变化，临用混合

（b）单标移液管吸液准确，外壁也需擦干净

（c）体积需控制在一定范围内，对pH有影响

（d）煮沸时间要一致

（e）注意指示剂加入时间和加入量一致

（f）滴定速度一致（后滴定0.5～1mL，1min内完成）

（g）产物Cu2O不稳定，亚甲基蓝变色也不稳定，暴露于空气或沸腾颜色变化，滴定过程不能摇动，不可中途中止加热

;斐林试剂快速法

在斐林试剂中加入亚铁氰化钾（黄血盐）反应终点为蓝色消失，淡黄色出现。反应终点比廉－爱农法更为明显。;说明与讨论;说明与讨论;说明与讨论;为消除氧