液相色谱串联质谱法：中国法布雷病人群脱乙酰基神经酰胺三己糖苷检测的深度剖析.docxVIP

液相色谱串联质谱法：中国法布雷病人群脱乙酰基神经酰胺三己糖苷检测的深度剖析

一、引言

1.1研究背景与意义

法布雷病（Fabrydisease），又称弥漫性躯体血管角化瘤，是一种X连锁隐性遗传的溶酶体贮积症，已被列入中国2018年5月颁布的首批121种罕见病目录。其致病根源是位于X染色体长臂q22.1上的GLA基因突变，致使其编码产物α-半乳糖苷酶A（α-GalA）出现错误折叠和修饰，活性降低或完全缺乏。当酶活性低于30%时，α-GalA无法正常水解代谢底物三己糖酰基鞘脂醇（GL-3）及其衍生物脱乙酰基GL3（Lyso-GL-3），这些物质便会在人体多种器官（如神经系统、肾脏、心脏、皮肤、肺、眼和耳等）的细胞溶酶体中进行性贮积，最终引发一系列复杂的临床症候群。

法布雷病在全球范围内均有报道，男性新生儿发病率为1/117,000-1/40,000。随着新生儿基因筛查技术的应用和普及，其实际患病率可能高于过去预期。在中国台湾地区，男性新生儿发病率达1/1250；美国伊利诺伊州和华盛顿州新生儿发病率分别为1/3000和1/10,000。该疾病临床表现极为复杂，早期可能仅表现为单一症状，随着年龄增长，逐渐出现多器官损伤。经典型法布雷病主要临床表现包括：始于儿童及青少年早期的间歇性发作性四肢末端（手、足）剧烈烧灼样疼痛或刺痛的肢端感觉异常；自幼少汗或无汗、不耐热、时有低热，以及随年龄增长在脐下至膝上出现的皮肤血管角质瘤；角膜自中心向周围扩展的涡轮样浑浊、晶体后囊细小颗粒物质呈轮辐样沉积（Fabry白内障）、视网膜和结膜可见动脉瘤和血管扭曲等眼部症状；儿童和青少年期尿中检出蛋白、管型和红细胞，随年龄增长蛋白尿增多及肾小管功能逐渐恶化，30-50岁逐渐出现氮质血症及终末期肾病，这也是患者死亡的主要原因；大多数患者中年时出现心脏病变症状，重症者可致充血性心力衰竭、猝死或心肌梗死，此外还可能出现胃肠道症状、脑血管病变、呼吸系统症状，以及高频性听力丧失、阳痿、乏力和焦虑、消沉等心理问题。除经典型外，还有肾脏变异型和心脏变异型，肾脏变异型常被误诊为原因不明的终末期肾病，心脏变异型男性患者到60-80岁才出现以左心室肥厚、左心功能不全、二尖瓣机能不全等为主要表现的肥厚型心肌病表现。

由于法布雷病临床表现的非特异性和异质性，患者常常在多个医院多科室辗转就医，疼痛可能被诊断为生长痛、幼年类风湿关节炎等，消化道症状被认为是肠胃炎等，皮疹被当作出血点，肾脏改变被诊断为慢性肾炎等，心脏受累被诊断为心律失常等，这导致诊断延迟，平均延迟时间可达15-20年。而早期诊断对于法布雷病的治疗和改善患者预后至关重要，因为在疾病早期，器官尚未发生不可逆损伤，此时进行干预可以有效延缓病情发展。目前，法布雷病的诊断主要依靠酶学检测、基因检测和生物标志物检测等手段。酶学诊断检测外周血白细胞或皮肤成纤维细胞中α-GalA酶活性，经典型患者酶活性严重缺乏，通常低于正常1%，但部分携带者酶活性可在正常范围，因此酶学检查检出携带者不可靠；GLA基因突变检测是确诊患者的可靠方法和确定女性杂合子的唯一方法；生物标志物检测如检测血浆或尿液中的GL-3、Lyso-GL-3水平，也为法布雷病的诊断提供了重要依据。

脱乙酰基神经酰胺三己糖苷（Lyso-GL-3）作为法布雷病的重要生物标志物，在疾病的诊断、病情监测和治疗评估中具有关键作用。研究表明，法布雷病患者体内Lyso-GL-3水平显著升高，且其水平与疾病的严重程度和进展密切相关。通过准确检测Lyso-GL-3水平，可以辅助早期诊断，尤其是对于一些临床表现不典型或酶学检测结果不明确的患者。在疾病治疗过程中，监测Lyso-GL-3水平的变化能够评估治疗效果，及时调整治疗方案。例如，在酶替代治疗（ERT）中，随着治疗的进行，Lyso-GL-3水平的下降反映了治疗的有效性，若水平持续不降或升高，则提示可能需要优化治疗策略。此外，对Lyso-GL-3的研究还有助于深入了解法布雷病的发病机制，为开发新的治疗方法和药物提供理论基础。因此，建立一种准确、可靠的检测Lyso-GL-3的方法对于法布雷病的诊疗具有重要的临床意义和科研价值。

1.2国内外研究现状

在国外，法布雷病的研究起步较早，取得了一系列重要成果。在流行病学方面，通过大规模的人群筛查和研究，对法布雷病在不同种族和地区的发病率、遗传特点有了较为清晰的认识。在诊断技术上，不断优化和创新，酶学检测方法不断改进以提高准确性和灵敏度，基因检测技术也日益成熟，能够快速准确地检测出各种GLA基因突变类型。同时，对生物标志物的研究也较为深入，除了Lyso-GL-3，