分子生物学基础理论概要和常用实验技术简介.pptVIP

报告主要内容;一、什么是分子生物学？

二、分子生物学内容和原理

三、主要的理论成就

四、主要的应用成就

五、技术进步;一、什么是分子生物学？

从分子水平上研究生命现象物质基础的学科。研究细胞成分的物理、化学的性质和变化以及这些性质和变化与生命现象的关系，如遗传信息的传递，基因的结构、复制、转录、翻译、表达调控和表达产物的生理功能，以及细胞信号的转导等。;①核酸的分子生物学

研究内容包括核酸/基因组的结构、遗传信息的复制、转录与翻译，核酸存储的信息修复与突变，基因表达调控和基因工程技术的发展和应用等。

②蛋白质的分子生物学

蛋白质的分子生物学研究执行各生命功能的主要分子──蛋白质的结构与功能。

③信号转导的分子生物学

研究细胞内、细胞间信息传递的分子基础。在一些外源信号的刺激下，细胞可以将这些信号转变一系列的生物化学变化，例如蛋白质构象的转变、磷酸化以及蛋白与蛋白相互作用的变化等，从而使其增殖、分化及分泌状态等发生改变以适应内外环境的需要。信号转导研究的目标是阐明这些变化的分子机理，明确每一种信号转导与传递的途径及参与该途径的所有分子的作用和调节方式以及认识各种途径间的网络控制系统。;基本原理：

①构成生物体各类有机大分子的单体在不同生物中都是相同的。

②大分子建成规则相同。

③某一特定生物体所拥有的核酸及蛋白质分子决定了它的属性。;三、主要的理论成就;（1）已用基因工程的技术研制出了一批珍贵的基因工程药物：

①人生长抑素

②生产胰岛素

③生产生长激素

④生产组织型血纤维蛋白溶酶原激活因子

⑤抗血友病因子Ⅳ

⑥制备乙型肝炎疫苗

⑦生产多种细胞因子

⑧制备基因工程抗体;1.超离技术

2.电泳技术

3.电镜技术

4.X衍射与核磁共振

5.分子杂交技术

(Southern/Northern/Western/FISH)

6.基因克隆、基因文库

7.PCR;五、技术进步;16.单克隆抗体

17.基因工程抗体

18.基因诊断

19.基因治疗

20.基因作图

21.差异显示

22.分子进化工程;相关基础分子生物学理论;1、关??基因的概念;2、从分子水平来说，基因有三个基本特性：

①基因可自体复制；

②基因决定性状，即基因通过转录和翻译决定多肽链的氨基酸顺序，从而决定某种酶或蛋白质的性质，而最终表达为某一性状

③基因的突变，即基因虽很稳定，但也会发生突变。一般来说，新的突变的等位基因一旦形成，就可通过自体复制，在随后的细胞分裂中保留下来。

;3、基因的功能类型;④断裂基因或隔裂基因（splitgene),指一个结构基因内部为一个或者更多的不翻译的编码顺序。;;◆基因突变(genemutation)：染色体上某一基因位点内部发生了化学性质(结构)的变化，与原来基因形成对性关系。

例如：植物高秆基因D突变为矮秆基因d。

经典遗传学认为：基因是一个“点”，在染色体上具有一定的位置和相互排列关系。而基因突变就是一个点的改变，是以一个整体进行突变。因此从经典遗传学水平看，基因突变又称为“点突变”(pointmutation)。

◆locus与site

现代基因概念认为：基因是DNA分子带有遗传信息的碱基序列；基因是由众多碱基对构成，此时将一个碱基对称为基因的一个座位(site)；基因在染色体上的位置则称为位点(locus)。;5、基因突变的类型;④从突变所引起的遗传信息意义的改变：

错义突变（missensemutation）:是指DNA分子中碱基改变后引起密码子变化。导致所编码的氨基酸发生替代，从而影响蛋白质功能，以至影响到突变体的表型。

无义突变（nonsensemutation）:是指由于DNA的碱基改变导致编码氨基酸的密码子突变成终止密码子。引起mRNA翻译提前终止，产生一条短的不完整的多肽链。无义突变通常对所编码的蛋白活性有严重影响。

;同义突变(沉默突变silentmutation）:是指DNA分子中的碱基改变后，突变的密码子仍然编码原来的氨基酸，并没有引起多肽链中氨基酸的变化。

不会引起表型突变，它们以多态的形式在生物体DNA中积累，引起同种生物不同个体间DNA序列的变化。

延长肽链突变：终止密码子突变成氨基酸的密码子。;1、中心法则及其发展;

反转录(逆转录)：

反转录酶；

cDNA。

RNA的自我复制。

DNA指导蛋白质合成。;2、遗传密码及其特性;起始密码子与终止密码子：

起始密码子：

AUG(甲硫氨酸/甲酰甲硫氨酸)；

终止密码子(无义密码子)：

UAA(赭石)、UAG(琥珀)、UG