2.第九章-实验误差及其控制.pptVIP

实验误差及其控制;一.误差公理与误差的表达

1.误差公理

误差——测定值与真实值之差

实验结果都会有误差，误差自始至终存在于一切科学实验过程（人们认识能力与科学技术水平的限制，测量方法与工具的有限性，抽样误差不可避免性等）。;2.误差的分类

产生原因与性质分为：随机误差、系统误差、过失误差。

误差的来源：自然误差、人为误差。

误差的可控性：可避免的误差（易控制）、不可避免的误差（不易控制）。;3.误差的表达

①精密度（重复性）

同一方法重复测定同一样品，测定值的一致程度。

衡量指标：标准差（S）、变异系数（CV）

CV（%）＝（S/X)×100%

例：重复测定某样品（n=10),x=7.120,s=0.155

CV=2.18%;例：高效液相色谱测定阿米替林;②准确度（测定值与真实值的接近程度）

偏差系数（CB）

CB（%）＝100%－R（%）

R（%）＝[(VP－VB)/VA]×100%

R＝回收率

VA＝加入标准量；VB＝未加标准量前的测定值

VP＝加入标准量后的测定值；回收量＝VP－VB

如：5次测定血清某物质的均值为15mg/L，加入该物质标准量10mg/L，则得均值为24.5mg/L，计算回收率：R（%）＝[(24.5－15)/10]×100%＝95%

范围：100±1－10%;如：高效液相色谱测定阿米替林;

③偏倚（系统误差）

如某抗菌药物标准品100mg连续5次称重：

天平正确，技术熟练99.99－100.01mg

天平正确，操作不熟练98.00－102.00mg

天平不正确，操作熟练94.99－95.01mg

天平不正确，操作不熟练93.00－97.00mg;二.随机误差

特点：双向性，分布随机性，不可避免性和可减性

原因：1.抽样误差

2.非均匀误差（受试对象性别、年龄、生活习惯、工作条件、居住环境。)

3.分配误差（受试对象组间分配）

4.分野误差（细胞计数）

5.偶然误差（黑子爆炸，影响电生理）

;减少随机误差的主要方法：

随机化和对照原则；2.分层抽样；3.交叉实验；

4.盲法；5.调整样本的大小和适当增加重复数

Sx=s/n，增大样???数，减少标准误

增加重复数，平行管，三管测定，减少标准误;三.系统误差

特点：单向性，恒差和/或恒比，可消性。

表现形式：

1.恒定系统误差（偏向真实值的一侧）

仪器末校正，样品处理

2.线性系统误差（测定时间与空间顺序）

生物物质效应，药物作用，酶催反应（测定值与时间有关）

肌肉疲劳实验：开始收缩幅度大，密集；一段时间后，收缩幅度小，间歇加大。

3.非线性系统误差

测定时间延续而呈曲线变化或周期性变化

糖皮质激素分泌：上午8－10点分泌高峰，午夜12点最低。

月经周期－雌激素变化;系统误差的原因：

①仪器误差（仪器损耗，未校正）

②方法差异（采用方法不同，如微量蛋白质测定有化学分析法，放免法与ELISA法；样品处理方法不同（浓度，PH，温度，作用时间等）

③试剂差异

6级：保证试剂（GR，必需时用）；分析试剂（AR，科研用）；化学纯（CP）；实验室试剂（LR，中学生用）；生物试剂（BR）；工业试剂（浓硫酸，重铬酸盐）。;④条件差异

受试对象环境条件：动物（气候，季节，温度，湿度通风，照明，营养状况）

病人（湿度，温度，通风，照明，饮食，服务态度）

实验室环境条件：季节变化，湿度

⑤顺序差异

a.个体生物钟现象（昼夜，季节，近海地区潮汐的涨落变化）

睡眠与觉醒，体温，血压，心率，血浆中激素水平等

BP，HR：上午9:00-10:00最高，凌晨3:00最低

犬冠脉左旋支的血流量：16:00比上午8:00高12.8%;血小板聚集性：上午6－9时，聚集性显著增强

心肌梗死和心源性猝死：早晨醒后死亡率明显增加，

9:00－10:00高峰

皮内注射致敏原后