大口黑鲈IL-12表达分析及异构体组成形式鉴定.pdfVIP

文章编号:1000-0615(2026)01-019103-17,2026,50(1):019103

JOURNALOFFISHERIESOFCHINA

DOI:10.11964/jfc.20250214885

严孟芝,王丹丹,杨静,等.大口黑鲈IL-12表达分析及异构体组成形式鉴定[J].水产学报,2026,50(1):019103.

YanMZ,WangDD,YangJ,etal.CharacterizingIL-12expressionandidentifyingitsisoformprofilesinlargemouthbass

(Micropterussalmoides)[J].JournalofFisheriesofChina,2026,50(1):019103(inChinese).

大口黑鲈IL-12表达分析及异构体组成形式鉴定

1,21,21,21,21,2

严孟芝，王丹丹，杨静，黎洁，曾辉，

1,2*1,2*

张永安，周洋

(1.华中农业大学水产学院，湖北武汉430070；

2.华中农业大学，长江经济带大宗水生生物产业绿色发展教育部工程研究中心，湖北武汉430070)

摘要：【目的】为探究大口黑鲈白细胞介素12(IL-12)异构体的组成形式和功能特征。【方法】

克隆大口黑鲈IL-12亚基基因全长cDNA序列，通过多序列比对分析蛋白序列保守结构；

qPCR方法检测大口黑鲈IL-12组织表达谱；基于时间序列转录组测序解析不同IL-12亚基

基因在感染鰤鱼诺卡氏菌后的表达变化；通过Co-IP实验在真核细胞内验证IL-12亚基间

的相互作用；体内过表达IL-12融合蛋白并检测脾脏中IFN-γ基因的表达变化。【结果】成

功克隆大口黑鲈4个IL-12亚基基因p35a、p40a、p40b和p40c，多序列比对结果表明，4

个亚基中存在多个参与二硫键形成的保守半胱氨酸位点。qPCR显示4个亚基在肝脏、脾

脏、头肾等6个组织中存在差异表达。转录组结果表明，p40c基因在头肾和脾脏中均呈持

续抑制现象，p40b基因在头肾中持续抑制，而在脾脏中感染第2天上调后逐步回落，p35a、

p40a和p40b在头肾和脾脏中表达模式不同。Co-IP实验证实大口黑鲈p35a与p40b、p40c

存在稳定的相互作用。体内过表达由GSlinker串联的p40b+p35a和p40c+p35a均能显著上

调脾脏中IFN-γ表达水平。【结论】IL-12亚基在健康组织中广泛分布，在鰤鱼诺卡氏菌感

染后，p40基因均出现表达受抑制现象。结构分析揭示大口黑鲈IL-12亚基与哺乳动物高

度保守，且p35a亚基分别与