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高中生物选修三知识点详解

高中生物选修三《现代生物科技专题》聚焦于当代生命科学领域最具活力和发展前景的前沿技术。这些技术不仅深刻改变了我们对生命世界的认知，也在医药、农业、环保等诸多领域产生了革命性的影响。本专题的学习，旨在帮助同学们理解这些复杂技术的基本原理，并认识其在实践中的广泛应用及由此引发的伦理思考。

一、基因工程（GeneticEngineering）

基因工程，又称基因拼接技术或DNA重组技术，其核心在于“剪切”和“粘贴”基因，即按照人们的意愿，把一种生物的某种基因提取出来，加以修饰改造，然后放到另一种生物的细胞里，定向地改造生物的遗传性状。

（一）基因工程的核心工具

基因工程的操作离不开一系列关键的工具酶和载体。

1.限制性核酸内切酶（RestrictionEndonuclease）：这类酶主要从原核生物中分离纯化得到，它们能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列（通常为回文序列），并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。因此，限制性内切酶被形象地称为“分子手术刀”。其作用结果是产生黏性末端或平末端，这为后续的DNA片段连接创造了条件。

2.DNA连接酶（DNALigase）：如果说限制性内切酶是“剪刀”，那么DNA连接酶就是“针线”。它的作用是将两个双链DNA片段连接起来，恢复被限制酶切开的磷酸二酯键，从而形成一个完整的重组DNA分子。常用的DNA连接酶有E·coliDNA连接酶和T4DNA连接酶，它们在作用底物和连接效率上略有差异。

3.载体（Vector）：要将目的基因送入受体细胞，需要一个“分子运输车”，即载体。理想的载体需要具备以下条件：能够在宿主细胞中稳定存在并自我复制，以便目的基因能随之扩增；具有一个或多个限制酶切点，便于目的基因的插入；具有某些标记基因，便于对含有目的基因的受体细胞进行筛选，如抗生素抗性基因等。常用的载体有质粒（一种裸露的、结构简单、独立于细菌拟核DNA之外，并具有自我复制能力的很小的双链环状DNA分子）、噬菌体和动植物病毒等。

（二）基因工程的基本操作程序

基因工程的操作过程大致可分为四个主要步骤：目的基因的获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。

1.目的基因的获取：目的基因主要是指编码蛋白质的结构基因，也可以是一些具有调控作用的因子。获取方法多样，包括从基因文库中获取（基因组文库、cDNA文库）、利用PCR技术（聚合酶链式反应）扩增目的基因，以及如果基因序列已知，还可以通过化学方法直接人工合成。

2.基因表达载体的构建：这是基因工程的核心步骤。将目的基因与载体结合，形成重组DNA分子。一个基因表达载体的组成，除了目的基因外，还必须有启动子（一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的首端，是RNA聚合酶识别和结合的部位，驱动基因转录出mRNA）、终止子（位于基因的尾端，使转录在所需要的地方停止）以及标记基因等。构建过程中，需用相同的限制酶切割目的基因和载体，以产生相同的黏性末端（或平末端），再通过DNA连接酶连接。

3.将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞的不同，导入方法也各异。将目的基因导入植物细胞常用农杆菌转化法（利用农杆菌的Ti质粒上的T-DNA可转移至受体细胞并整合到受体细胞染色体DNA上的特性）、基因枪法或花粉管通道法；导入动物细胞最常用的是显微注射技术，受体细胞多为受精卵；导入微生物细胞（如大肠杆菌）则常用感受态细胞法，即用氯化钙处理微生物细胞，增大细胞膜的通透性，使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态。

4.目的基因的检测与鉴定：这一步骤至关重要，以确保目的基因已成功导入并正确表达。首先是分子水平的检测，包括利用DNA分子杂交技术检测目的基因是否插入受体细胞的染色体DNA中（DNA-DNA杂交），利用分子杂交技术检测目的基因是否转录出了mRNA（DNA-RNA杂交），以及利用抗原-抗体杂交技术检测目的基因是否翻译成蛋白质。其次，有时还需要进行个体水平的鉴定，如抗虫或抗病的接种实验，以观察生物体是否表现出相应的性状。

（三）基因工程的应用与发展前景

基因工程技术已在多个领域展现出巨大潜力。在医药卫生方面，用于生产基因工程药物（如胰岛素、干扰素、生长激素等）和进行基因治疗（把正常基因导入病人体内，使该基因的表达产物发挥功能，从而达到治疗疾病的目的）；在农业生产上，培育抗虫、抗病、抗逆（如抗除草剂、抗盐碱）的转基因作物，以及改良畜产品品质；在环境保护领域，可用于环境监测（如利用基因工程菌检测有毒物质）和污染治理（如利用基因工程菌降解有毒有害化合物）。

然而，基因工程也伴随着潜在的风险和伦理争议，这需要我们在发展技术的同时，进行审慎的评估和规范的管理。

二、细胞工程（Cell