单链环否为质粒DNA中间体.pdfVIP

单链环是质粒的吗？

HeinteRiele,BénicdicteMichel和S.DuskoEhrlich

法国巴黎塞德克斯05区厄广场2号雅克莫诺，75251

由S.D.Ehrlich通讯

质粒pC194在Bacillussubtilis和Staphylococcusaureus中以环状双链和单链

形式存在。我们在，由pBR322和pC194组成的质粒pHV33在

Escherichiacoli中也以双链和单链形式存在，前提是pC194的功能完

好无损。单链pHV33通过互补链合成转化为双链，这可能是在

pBR322上存在的引体组装位点rriB处启动的。互补链合成的效率影响双链拷贝

数，这表明单链是质粒的。：Escherichiacoli/质粒

pC194/引点/单链/单链结合蛋白

引言

在枯草芽孢杆菌和金葡萄球菌中发现了一些质粒以双链和单链的形式

存在（teRiele等，1986）。已知其中一些质粒也可以在大肠杆菌中（Goze和

Ehrlich，1980）。我们使用了一种这样的质粒pC194与pBR322的杂交体来研究

coli中的单链合成。当pC194功能活跃时，观察到了单链环。它们通

过在体组装位点启动的互补链合成转化为双链（Arai和Kornberg，1981）。

这些结果表明，单链环是pC194过程中的。

结果

E.coli中的单链质粒

单链环状质粒可以在细胞裂解物中检测到，它在琼脂糖凝胶中的迁移速度比超螺旋双

链单体环更快，并且在电泳未变性的情况下可以结合到硝酸纤维素滤膜上（teRiele等，

1986）。质粒pBR322在coli中没有产生单链，根据这些（图1）。

Aresingle-strandedcircintermediatesinsmid

replication?

HeinteRiele,BénicdicteMichelandS.DuskoEhrlich

InstitutJacquesMonod,2ceJussieu,75251ParisCedex05,France

CommunicatedbyS.D.Ehrlich

smidpC194existsascirculardouble-strandedandsingle-strandedinBacillus

subtilisandStaphylococcusaureus.WereportherethatthesmidpHV33,composed

ofpBR322andpC194,existsasdouble-andsingle-strandedinEscherichiacoli,

providedthatthereplicationfunctionsofpC194areintact.Single-strandedpHV33

isconvertedtodouble-strandedbycomplementarystrandsynthesisprobably

initiatedatrriB,aprimosomeassemblysitepresentonpBR322.Theefficiencyof

complementarystrandsynthesisaffectsthedouble-strandedcopynumber,which

suggeststhatsingle-strandedisasmidreplicationintermediate.Keywords: