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烟草AP2_ERF转录因子NtESR2的克隆及功能分析.pdf

生物技术通报

·研究报告·BIOTECHNOLOGYBULLETIN2025,41(4):266-277

烟草AP2/ERF转录因子NtESR2的克隆及功能分析

12132221

卢勇杰夏海乾李永铃张文建余婧赵会纳王兵许本波

雷波2

(1.长江大学生命科学学院涝渍灾害与湿地农业湖北省重点实验室,荆州434025;2.贵州省烟草科学研究院,贵阳550081;3.遵义市烟草公

司凤冈县分公司,遵义563000)

摘要:【目的】AP2/ERF(APETALA2/ethylene-responsivefactor)转录因子家族中的ESR2基因对植物叶芽发育调控具有重

要的作用。克隆烟草NtESR2基因并分析其功能,为烟草叶芽的发育调控提供靶标基因。【方法】采用同源克隆从栽培烟草

(NicotianatabacumL.)中克隆NtESR2基因,并进行生物信息学、基因表达、激素响应和亚细胞定位分析,同时利用CRISPR/Cas9

编辑技术创制NtESR2a和NtESR2b双突变体ntesr2,观察ntesr2突变体的表型。【结果】NtESR2在栽培烟草中具有2个拷贝(NtESR2a

和NtESR2b),其CDS长度分别为1188bp和1200bp,分别编码395和399个氨基酸;NtESR2a蛋白定位于细胞核,NtESR2b蛋白

定位于细胞核和细胞膜上,2个蛋白都具有1个AP2结构域,属于ERF亚族,其中NtESR2a来自林烟草,NtESR2b来自绒毛状烟草。

NtESR2基因在烟草的根、茎、叶、顶芽、腋芽和花中均有表达,其中在顶芽和腋芽表达较高。通过顺式作用元件分析和外源激素

处理,表明该基因受到多种植物激素的调控。ntesr2突变体表现出子叶融合和分生组织缺失的性状,NtCUC2、NtLAS、NtREV、

NtYUCCA和NtPIN1基因表达显著下调。【结论】从烟草中克隆得到ERF转录因子NtESR2的2个成员,在烟草顶芽和腋芽中表达较

高,受到生长素等多种植物激素的调控,NtESR2通过调控生长素的运输来影响烟草叶芽的形态建立过程,研究结果为调控烟草叶

芽发育提供理论依据。

关键词:烟草;NtESR2;CRISPR/Cas9;子叶融合;分生组织;生物信息学分析;亚细胞定位

DOI:10.13560/ki.biotech.bull.1985.2024-0894

CloningandExpressionAnalysisofAP2/ERFTranscriptionFactor

NtESR2inNicotianatabacum

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LUYong-jieXIAHai-qianLIYong-lingZHANGWen-jianYUJingZHAOHui-naWANGBing

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