紫外分光光度法水质检测实操.docxVIP

紫外分光光度法水质检测实操

紫外分光光度法作为一种快速、灵敏且操作相对简便的分析技术，在水质检测领域占据着重要地位。它主要利用物质对紫外光区特定波长光的吸收特性，来进行定性或定量分析。相较于一些传统方法，它往往无需复杂的显色反应，能有效缩短分析时间，尤其适用于水中某些有机物、无机离子的快速筛查与测定。本文将聚焦于该方法在水质检测中的实际操作要点与关键环节，旨在为相关从业人员提供一份具有指导意义的实操参考。

一、方法原理简述

物质分子中的价电子能够吸收特定波长的紫外光能量，从基态跃迁到激发态。不同物质因其分子结构各异，对紫外光的吸收波长和吸收强度也各不相同。紫外分光光度法正是基于这一原理，通过测定水样在特定紫外波长下的吸光度，再结合朗伯-比尔定律（即在一定浓度范围内，物质的吸光度与其浓度成正比），从而计算出水中目标污染物的浓度。例如，水中的硝酸盐氮在特定紫外波长处有特征吸收，而一些芳香族有机物则在另一特定波段表现出较强吸收。

二、主要仪器与试剂

（一）核心仪器

1.紫外可见分光光度计：这是核心设备，应能覆盖紫外光区（通常为190nm-400nm）及可见光区。仪器需定期进行性能校验，确保波长准确度、光度准确度和稳定性符合要求。

2.比色皿：通常为石英比色皿，因为玻璃比色皿会吸收紫外光，无法用于紫外区测定。根据测定波长和光程长度选择合适的比色皿，常见的有1cm、2cm、5cm等光程。使用前需检查其配对性和光学面的清洁度。

3.移液管、容量瓶：用于准确移取和配制溶液，需经校准，确保体积准确性。

4.天平：用于称量固体试剂，精度应满足实验要求。

5.其他辅助设备：如超声波清洗器（用于清洗比色皿）、移液器、烧杯、漏斗、过滤装置（如需要去除悬浮物）等。

（二）主要试剂

1.纯水：通常为超纯水或去离子水，其水质应符合相关检测标准的要求，尤其是在测定波长处应具有极低的吸光度，以避免背景干扰。

2.标准物质：用于配制标准溶液，应选用经国家计量部门认证、在有效期内的标准品。

3.辅助试剂：根据具体检测项目的需求，可能需要用到一些化学试剂，如用于调节pH值的酸碱溶液、用于去除干扰的掩蔽剂等。所用试剂纯度等级应满足分析要求。

三、实操步骤详解

（一）准备工作

1.实验室环境：确保实验室温度、湿度相对稳定，洁净无尘，避免强光直射和腐蚀性气体。

2.仪器检查与预热：开启分光光度计前，检查电源是否正常，仪器各部件是否完好。开机后，按照仪器说明书要求进行预热，通常需预热一段时间以保证光源和检测器稳定。

3.比色皿的清洗与检查：用纯水冲洗比色皿数次，若有油污可用合适的有机溶剂（如乙醇）清洗，再用纯水洗净。清洗后，用擦镜纸轻轻擦拭光学面，注意避免划伤。检查比色皿是否有裂纹、毛边，光学面是否洁净、无划痕。

4.试剂准备：根据检测项目，准确配制所需的标准溶液系列、空白溶液以及必要的辅助试剂。标准溶液的配制应严格按照操作规程进行，确保浓度准确。

（二）样品采集与预处理

1.样品采集：水样的采集必须具有代表性，严格按照相关的采样规范进行。采样容器应洁净、无污染，必要时需进行特殊处理（如酸洗、硅烷化等）。

2.样品保存：采集后的水样应尽快分析。若不能及时分析，需根据不同检测项目的要求，采取适当的保存措施，如冷藏、添加化学保存剂等，但保存时间不宜过长。

3.样品预处理：根据水样的性质和检测项目的要求，可能需要进行预处理。例如，对于浑浊水样，需进行过滤或离心处理以去除悬浮物，避免其对光的散射和吸收干扰测定。对于某些需要转化形态才能测定的物质，可能需要进行消解等处理步骤。预处理过程应尽可能减少目标物的损失和污染。

（三）仪器校准与参数设置

1.波长校准：定期对仪器的波长准确度进行校准，确保测定波长的准确性。

2.参数设置：根据检测项目的特性，在分光光度计上设置合适的测定波长。对于某些物质，可能需要在特定的两个波长处分别测定吸光度（如双波长法）以消除干扰。同时设置合适的光谱带宽、测量模式（如吸光度、透光率）等参数。

（四）空白溶液的测定与校正

1.空白溶液的选择：空白溶液应尽可能与样品溶液的组成相似，通常为纯溶剂（如纯水）或不含目标物的其他试剂溶液。

2.测定空白：将空白溶液注入比色皿，放入样品室的比色皿架中，确保光路对准。进行空白溶液的吸光度测定。

3.空白校正：根据仪器功能，可以选择进行基线校正或空白扣除，以消除溶剂、试剂以及比色皿本身对光吸收的影响。

（五）标准系列的配制与测定（校准曲线法）

1.标准系列配制：取一定体积的标准储备液，用空白溶液或特定溶剂逐级稀释，配制成一系列不同浓度的标准溶液。浓度范围应覆盖预计样品中目标物的浓度。

2.测定标准系列：按照浓度由低到高的顺序，依次将标准