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皮肤科真菌镜检及培养知情同意书

尊敬的患者及家属：

为帮助您了解皮肤科真菌镜检及培养的相关信息，保障您的知情权利与医疗安全，现将该检查的目的、操作流程、潜在风险、注意事项及您的权利义务等内容向您详细说明，请您仔细阅读并充分理解后签署本同意书。

一、检查目的与意义

皮肤真菌感染是皮肤科常见疾病，包括体股癣、手足癣、甲癣（灰指甲）、头癣、花斑糠疹等，临床表现多样（如红斑、脱屑、水疱、甲增厚变形等）。部分病例因症状不典型、合并其他皮肤疾病或长期外用激素等因素，仅通过肉眼观察或经验性诊断可能出现误诊或漏诊，导致治疗无效或病情反复。

真菌镜检（直接镜检）是通过显微镜观察样本中是否存在真菌菌丝、孢子等结构，具有快速（通常30分钟内出结果）、操作简便的特点，可初步判断是否存在真菌感染，为临床提供即时参考。但受样本采集质量、真菌分布密度（如早期感染或局部用药后）及观察者经验影响，可能出现假阴性（即实际感染但未检出）。

真菌培养则是将样本接种于特定培养基（如沙堡弱培养基），在适宜温度（25-28℃）下培养1-4周（多数致病菌1-2周可见菌落），通过观察菌落形态、颜色及显微镜下结构，进一步明确真菌种类（如皮肤癣菌、念珠菌、马拉色菌等），并可进行药物敏感试验（部分实验室开展），指导精准用药。培养结果对疑难病例、复发病例及免疫力低下患者（如糖尿病、长期使用免疫抑制剂者）的诊断和治疗具有重要价值。

两项检查联合应用（镜检初筛+培养确诊）可显著提高真菌感染的诊断准确率，避免因经验性治疗导致的药物滥用（如盲目使用抗真菌药）或延误病情（如将真菌感染误诊为湿疹、银屑病等）。

二、操作流程与具体步骤

（一）真菌镜检操作流程

1.样本采集：根据感染部位选择样本类型及采集方法：

-皮肤损害（如体股癣、手足癣）：用消毒钝刀轻刮皮损边缘（此处真菌密度较高）的新鲜脱屑，避免刮取表面已脱落的皮屑或渗液；

-毛发（头癣）：用镊子拔取无光泽、易折断的病发（根部可见菌鞘或断发），数量5-10根；

-指（趾）甲（甲癣）：用指甲剪或手术刀刮取病甲远端或甲下碎屑（需去除表面已破坏的甲质，取接近甲床的深层样本）；

-黏膜（如口腔、外阴念珠菌病）：用无菌棉拭子轻擦黏膜表面分泌物；

-特殊部位（如花斑糠疹）：可结合Wood灯（滤过紫外线灯）辅助定位，刮取荧光阳性区域的皮屑。

采集过程中，医护人员会严格遵循无菌原则，使用一次性器械（如刀片、镊子、棉拭子），避免交叉感染。

2.样本处理与镜检：将采集的样本置于载玻片上，滴加10%-20%氢氧化钾（KOH）溶液1-2滴（可溶解角质，清晰显示真菌结构），盖上盖玻片，轻微加热（促进角质溶解）后静置5-10分钟，用光学显微镜（10×、40×物镜）观察是否存在菌丝（细长、分隔或不分隔的管状结构）、孢子（圆形或椭圆形颗粒）或其他特征性结构（如念珠菌的假菌丝、马拉色菌的“葡萄串+腊肠”样结构）。

（二）真菌培养操作流程

1.样本接种：采集的样本需在2小时内（室温下）或4℃保存（不超过24小时）后接种至培养基。常用培养基包括沙堡弱葡萄糖琼脂（SDA，含氯霉素抑制细菌生长）、含放线菌酮的SDA（抑制腐生真菌，利于皮肤癣菌生长）及巧克力琼脂（用于念珠菌等需氧菌培养）。接种时，将样本均匀涂布于培养基表面，或用无菌镊子将较大样本（如甲屑、毛发）埋入培养基浅层。

2.培养与观察：培养基置于25-28℃恒温培养箱（深部真菌如隐球菌需37℃培养），每日观察是否有菌落生长。皮肤癣菌通常3-7天出现菌落（如红色毛癣菌为白色绒毛状，逐渐变为粉红色；须癣毛癣菌为白色蜡样），念珠菌3-5天可见白色奶油状菌落，马拉色菌需含油脂的培养基（如Dixon培养基），5-7天出现小而圆的奶油色菌落。

3.菌种鉴定：菌落形成后，通过肉眼观察菌落形态、颜色、边缘特征及培养基变色情况（如红色毛癣菌可使培养基变红），结合显微镜下形态（如乳酸酚棉蓝染色观察菌丝、孢子形态）进一步确认菌种。必要时需进行生化试验（如念珠菌的芽管试验、糖发酵试验）或分子生物学检测（如PCR扩增ITS区测序）。

三、潜在风险与不适

真菌镜检及培养为无创性检查，总体风险极低，但仍可能出现以下情况，需您知悉：

1.样本采集相关：

-轻微疼痛或不适：刮取皮屑、拔取病发时可能因刺激皮肤或毛囊产生短暂疼痛（类似轻微摩擦感），通常可耐受；

-局部皮肤反应：少数患者（尤其是敏感皮肤或婴幼儿）可能出现采样部位短暂发红（1-2小时内自行消退），罕见皮肤破损（如过度用力刮擦），医护人员会根据您的耐受程度调整操作力度；

-交叉污染风险：虽严格使用一次性器械，