乳制品生产技术原料乳的验收70课件讲解.pptxVIP

乳制品生产技术——原料乳的验收黑龙江农业经济职业学院

目录任务一乳的新鲜度检验任务二乳中三聚氰胺的检测任务三乳的掺假检验任务四乳的理化检验任务五乳的微生物检验乳中三聚氰胺的检验——液相色谱法

乳中三聚氰胺的检验——液相色谱法任务二乳中三聚氰胺的检验——液相色谱法【案例导入】从2008年3月开始，某知名企业陆续接到投诉，一些婴幼儿食用该品牌的婴幼儿乳粉后出现肾结石等泌尿系统疾病，2008年8月经专家鉴定，该品牌的问题奶粉中查出导致肾病的工业用三聚氰胺，事件引起高度关注和对乳制品安全的担忧。2008年9月24日，中国国家质检总局表示，牛奶事件已得到控制，2008年9月14日以后新生产的酸乳、巴氏杀菌乳、灭菌乳等主要品种的液态奶样本的三聚氰胺抽样检测中均未检出三聚氰胺。为什么工业用三聚氰胺被用于乳制品的生产呢？

乳中三聚氰胺的检验——液相色谱法一、原理用乙腈作为原料乳中的蛋白质沉淀剂和三聚氰胺提取剂，强阳离子交换色谱柱分离，高效液相色谱-紫外检测器/二极管阵列检测器检测，外标法定量。

乳中三聚氰胺的检验——液相色谱法二、操作过程1、提取称取牛乳2g（精确至0.01g）试样于50mL具塞塑料离心管中，加入15mL，三氯乙酸溶液和5mL乙腈，超声提取10min，再振荡提取10min后，以不低于4000r/min离心10min。上清液经三氯乙酸溶液润湿的滤纸过滤后，用三氯乙酸溶液定容至25mL，移取5mL滤液，加入5mL水混匀后作待净化液。

乳中三聚氰胺的检验——液相色谱法2、净化将1中的待净化液转移至固相萃取柱中。依次用3mL水和3mL甲醇洗涤，抽至近干后，用6mL氨化甲醇溶液洗脱。整个固相萃取过程流速不超过1mL/min。洗脱液于50℃下用氮气吹干，残留物（相当于0.4g样品）用1mL流动相定容，涡旋混合1min，过微孔滤膜后，供HPLC测定。

乳中三聚氰胺的检验——液相色谱法3、高效液相色谱测定（1）HPLC参考条件：色谱柱：C8柱，250mm×4.6mm（i.d.），5μm，或相当者；C18柱，250mm×4.6mm（i.d.），5μm,或相当者。流动相：C8柱，离子对试剂缓冲液-乙腈（85+15，体积比），混匀。C18柱，离子对试剂缓冲液-乙腈（90+10，体积比），混匀。流速：1.0mL／min。柱温：40℃。波长：240nm。进样量：20μL。

乳中三聚氰胺的检验——液相色谱法（2）标准曲线的绘制。用流动相将三聚氰胺标准贮备液逐级稀释得到的浓度为0.8、2、20、40、80μg/mL的标准工作液，浓度由低到高进样检测，以峰面积-浓度作图，得到标准曲线回归方程。基质匹配加标三聚氰胺的样品HPL色谱图参见对应图谱。（3）定量测定。待测样液中三聚氰胺的响应值应在标准曲线线性范围内，超过线性范围则应稀释后再进样分析。

乳的基本知识生鲜牛乳的国家质量标准乳的新鲜度检验（4）结果计算。试样中三聚氰胺的含量由色谱数据处理软件或按下式计算：