团体标准 T_CTEA 002—2024 甘蔗叶片赤腐病抗性评价技术规程.docxVIP

团体标准T/CTEA002—2024甘蔗叶片赤腐病抗性评价技术规程

TechnicalSpecificationforResistanceEvaluationofSugarcaneLeafRedRotDisease

1范围

本文件规定了甘蔗叶片赤腐病抗性评价的术语和定义、评价原则、材料与仪器、接种准备、接种方法、病情调查、抗性分级、结果判定及评价报告等内容。

本文件适用于我国各类甘蔗品种（系）、种质资源的叶片赤腐病抗性鉴定与评价工作，可供农业科研机构、育种单位、糖业企业及农业技术推广部门使用，为甘蔗抗病育种、品种审定及田间病害防控提供技术依据。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T19557.1植物品种特异性、一致性和稳定性测试指南总则

GB/T23222甘蔗种苗

NY/T393绿色食品农药使用准则

NY/T1156.2农药室内生物测定试验准则杀菌剂第2部分：抑制菌丝生长试验

NY/T1464.32农作物品种试验技术规程第32部分：甘蔗

SB/T10994糖料甘蔗栽培技术规程

GB4285农药安全使用标准

GB/T8321农药合理使用准则（所有部分）

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1甘蔗叶片赤腐病

由镰孢属真菌（主要为FusariummoniliformeSheld.及Fusariumproliferatum(Matsush.)Nirenberg）引起的甘蔗叶部病害，主要危害叶片及叶鞘，表现为叶片出现赤褐色病斑、后期病斑上产生粉红色分生孢子堆，严重时导致叶片干枯、影响光合作用，进而降低甘蔗产量及糖分。

3.2抗性评价

通过人工接种或田间自然发病调查，结合病情指标对甘蔗品种（系）抵抗叶片赤腐病的能力进行分级判定，明确其抗性水平的过程。

3.3接种体

用于人工接种的甘蔗叶片赤腐病病原菌菌液、菌块或孢子悬浮液，需保证纯度高、致病性稳定，符合抗性评价试验要求。

3.4病情指数

综合反映病害发生程度的量化指标，结合病叶率、病级等参数计算得出，数值越高表示病害发生越严重，品种抗性越弱。

3.5抗病性分级

根据病情指数或病斑扩展情况，将甘蔗品种（系）对叶片赤腐病的抗性划分为不同等级，通常包括高抗、中抗、中感、高感等类型。

4评价原则

4.1科学性原则

采用标准化的接种方法、调查指标及分级标准，确保试验条件一致、数据客观准确，评价结果具有科学性和可靠性。

4.2一致性原则

同一批次评价试验应在相同的环境条件（温湿度、光照、土壤）、接种浓度及调查时间下进行，不同批次试验需设置对照品种，保证评价结果的可比性。

4.3实用性原则

评价方法应简便易行、成本可控，抗性分级标准贴合生产实际，为甘蔗抗病育种、品种推广及病害防控提供实用依据。

4.4安全性原则

病原菌培养、接种及废弃材料处理过程应符合生物安全要求，避免病原菌扩散污染环境；试验中使用的药剂需符合GB4285规定，做好人员防护。

5材料与仪器

5.1试验材料

5.1.1供试品种（系）：选取待评价的甘蔗品种（系），每个品种（系）设置3次重复，每次重复种植10~15株，株行距为50cm×100cm，种植条件符合SB/T10994规定。

5.1.2对照品种：设置已知抗性水平的对照品种，高抗对照选用“桂糖42号”，高感对照选用“粤糖93-159”，与供试品种同期种植、相同条件管理。

5.1.3病原菌：从田间自然发病的甘蔗叶片上分离纯化得到的镰孢属病原菌，经鉴定确认后保存，接种前进行活化培养，确保致病性稳定。

5.1.4培养基：采用马铃薯葡萄糖琼脂培养基（PDA）用于病原菌分离、纯化及菌丝培养；采用马铃薯葡萄糖液体培养基（PDB）用于孢子悬浮液制备。

5.1.5辅助材料：无菌水、吐温-80、脱脂棉、接种针、移液管、培养皿、保鲜膜、标签纸等，均符合无菌试验要求。

5.2试验仪器

5.2.1培养设备：恒温培养箱（精度±1℃）、生物安全柜、摇床（转速范围0~200r/min），用于病原菌培养及接种体制备。

5.2.2检测仪器：电子天平（精度0.001g）、显微镜（放大倍数≥400倍）、紫外分光光度计，用于病原菌鉴定、孢子浓度测定。

5.2.3田间工具：卷尺（精度0.1cm）、游标卡尺、记号笔、调查记录表、相机，用于病情调查及数据记录。

5.2.4其他设备：高压蒸汽灭菌锅、干燥箱、冰箱（-20℃），用于材料灭菌及病原菌保存。

6接种准备

6.1病原菌活化与培养

6.1.1菌丝活化：将保存的病原菌菌株接种至