3.2.1 基因工程的基本操作程序 练习 高中生物新人教版选择性必修3（2022_2023学年）.docxVIP

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3.2.1基因工程的基本操作程序

单选题

1．以下为形成cDNA过程和PCR扩增过程示意图。据图分析，下列说法正确的是（????）

A．催化①过程的酶是RNA聚合酶

B．④过程发生的变化是引物与单链DNA结合

C．催化②⑤过程的酶都是DNA聚合酶，都能催化形成氢键

D．从骨骼肌细胞提取的RNA构建的cDNA经PCR过程可以获得胰岛素基因

【答案】B

【分析】1、由题意可知，①②③④分别表示反转录、DNA的复制、DNA解旋、引物结合到互补DNA链上及互补链的合成过程。

2、PCR技术是一项在生物体外复制特定DNA片段的核酸合成技术。目的：获取大量的目的基因。原理：DNA双链复制。过程：第一步：加热至90～95℃DNA解链为单链；第二步：冷却到55～60℃，引物与两条单链DNA结合；第三步：加热至70～75℃，热稳定DNA聚合酶从引物起始进行互补链的合成。

【详解】A、①过程表示逆转录过程，由逆转录酶催化完成，A错误

B、由题意可知，④表示引物结合到互补DNA链上及互补链的合成过程，B正确；

C、催化②⑤过程的酶都是DNA聚合酶，但是催化形成的是磷酸二酯键，不需要催化形成氢键，C错误；

D、骨骼肌细胞中不表达胰岛素基因，所以不能在骨骼肌细胞中提取出来胰岛素的RNA，无法构建cDNA，D错误。

2．2015年10月，我国科学家屠呦呦因发现青蒿素可以有效降低疟疾患者的死亡率而获得了诺贝尔生理学奖。某课题组为得到青蒿素产量高的新品系，通过一定的技术，使青蒿素合成过程的某一关键酶基因fps在野生青蒿中得到了过量表达，其过程如图所示。下列叙述正确的是（????）

A．构建重组质粒过程中，目的基因需插入Ti质粒的T-DNA上

B．基因表达载体包括目的基因、启动子、终止密码子和标记基因等

C．用荧光标记的fps基因作为探针可以检测目的基因是否成功表达

D．上图中①为逆转录酶，②为限制酶，PCR过程中需要用到解旋酶、DNA聚合酶等

【答案】A

【分析】据图分析可知，酶①为逆转录过程中所需的逆转录酶；酶②是处理目的基因和质粒，产生相同切口的限制酶；酶③是将目的基因和质粒连接，构建基因表达载体的DNA连接酶。

【详解】A、Ti质粒的T-DNA可以转移到受体细胞的染色体上，因此目的基因需插入Ti质粒的T-DNA上，A正确；

B、基因表达载体包括的是终止子，不是终止密码，B错误；

C、检测目的基因是否成功表达一般选择抗原-抗体杂交法，而用fps基因作为探针检测的是目的基因是否插入，C错误；

D、PCR过程中需要用到限制酶、DNA连接酶等，D错误。

故选A。

3．大肠杆菌乳糖操纵子包括lacZ、lacY、lacA三个结构基因（编码参与乳糖代谢的酶，其中酶a能够水解乳糖），以及操纵基因、启动子和调节基因。培养基中无乳糖存在时，调节基因表达的阻遏蛋白和操纵基因结合，导致RNA聚合酶不能与启动子结合，使结构基因无法转录；乳糖存在时，结构基因才能正常表达，调节过程如下图所示。下列说法错误的是（????）

A．结构基因转录时，只能以β链为模板，表达出来的酶a会使结构基因的表达受到抑制

B．过程①的碱基配对方式与②过程不完全相同，参与②过程的氨基酸都可被多种tRNA转运

C．若调节基因的碱基被甲基化修饰，可能导致结构基因持续表达，造成大肠杆菌物质和能量的浪费

D．据图可知，乳糖能够调节大肠杆菌中基因的选择性表达，没有发生细胞的分化

【答案】B

【分析】基因的表达：①转录：以DNA为模板，通过碱基互补配对原则，在RNA聚合酶的作用下合成mRNA；②翻译：以mRNA为模板，在核糖体的参与和酶的催化作用下，合成多肽链。

【详解】A、结构基因转录时，启动子在结构基因的左侧，RNA聚合酶只能从左侧往右侧移动，mRNA的合成方向为5→3，则模板链方向为3→5，只能以β链为模板。表达出来的酶a会水解乳糖，培养基中无乳糖存在时，调节基因表达的阻遏蛋白和操纵基因结合，导致RNA聚合酶不能与启动子结合，使结构基因无法转录，A正确；

B、过程①为转录，碱基配对方式有A-U、T-A、C-G、G-C，过程②为翻译，碱基配对方式有A-U、U-A、C-G、G-C，过程①的碱基配对方式与②过程不完全相同，色氨酸只有一种tRNA转运，B错误；

C、若调节基因的碱基被甲基化修饰，可能导致结构基因持续表达，不停合成酶a水解乳糖，造成大肠杆菌物质和能量的浪费，C正确；

D、据图可知，培养基中无乳糖存在时，调节基因表达的阻遏蛋白和操纵基因结合，导致RNA聚合酶不能与启动子结合，使结构基因无法转录；乳糖存在时，结构基因才能正常表达，由此可知，乳糖能够调节大肠杆菌中基因的选择性表达；大肠杆菌为单细胞生物，该过程发生基因的选择性表达，但